新闻详情
免 疫荧光定位不对的原因及解决方法
日期：2025-04-30 11:37
浏览次数：25
摘要：
免 疫荧光定位不对的原因及解决方法：
细胞核干扰
细胞核位置前面的细胞质染色干扰，可能是抗体浓度过高或孵育时间过长。可以尝试降低抗体浓度，或者缩短孵育时间，让信号更“纯净”。
细胞或组织状态不对
细胞或组织状态不好，可能导致目标蛋白的细胞定位异常。如果一直出现定位不对的问题，建议重新培养细胞，调整状态，或者重新取材，进行再次染色。
共定位问题
如果想证明某一细胞发生某种变化，比如既有某种蛋白表达，又有另一种蛋白表达，这就是共定位。如果两种蛋白不属于共...
免 疫荧光定位不对的原因及解决方法：
-
细胞核干扰
细胞核位置前面的细胞质染色干扰，可能是抗体浓度过高或孵育时间过长。可以尝试降低抗体浓度，或者缩短孵育时间，让信号更“纯净”。 -
细胞或组织状态不对
细胞或组织状态不好，可能导致目标蛋白的细胞定位异常。如果一直出现定位不对的问题，建议重新培养细胞，调整状态，或者重新取材，进行再次染色。 -
共定位问题
如果想证明某一细胞发生某种变化，比如既有某种蛋白表达，又有另一种蛋白表达，这就是共定位。如果两种蛋白不属于共定位，比如一种在膜上表达，一种在胞浆表达，这属于共表达。这种情况下，实验设计需要重新调整，验证结论。 -
核定位不对
核内表达的抗原定位可以用免 疫荧光或免 疫酶标。如果定位不正确，建议将封闭和打孔合为一步，即在封闭液中添加0.5% Triton-100，37℃封闭2小时。加一抗后zui好4℃孵育过夜（16小时）。