一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005045 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005045 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005045 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:BTN2A1
中文名称:嗜乳脂蛋白2亚型A1抗体
别 名;BK14H9.1; BT2.1; BT2A1_HUMAN; BTF1; BTN2A1;
Butyrophilin BTF1; Butyrophilin subfamily 2 member A1; CTA-14H9.1; DJ3E1.1.
研究领域;细胞生物 信号转导 细胞凋亡 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human,
产品应用;IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=3μg/Test ICC=1:100-500
IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;57kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human BTN2A1: 101-200/527 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;Preservative: 15mM Sodium
Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
小鼠α-胞衬蛋白(SPTAN1)elisa检测试剂盒 |
视黄醇脱氢酶10抗体 Anti-RDH10 |
JM4蛋白抗体 |
酪氨酸激酶B抗体 Anti-Trk B/NTRK2 |
JM4 |
核蛋白NHN1抗体 |
载脂蛋白L4抗体 |
ZC3H18/NHN1 |
锌指蛋白804A抗体 Anti-ZNF804A |
磷酸化核突触蛋白α抗体 Anti-phospho-Alpha synuclein (Tyr136) |
APOL4 |
肌动蛋白解聚因子抗体 |
神经细胞凋亡抑制蛋白抗体 Anti-NAIP |
Destrin |
小鼠抗人红细胞单克隆抗体 Anti-RBC(G2H4) |
NK细胞受体2D抗体 Anti-NKG2D/CD314/KLRK1 |
磷酸化沉默调节相关蛋白6抗体 Anti-phospho-SIRT6(Ser338) |
环指蛋白87 Anti-RNF87 |
ND4L抗体 |
联会复合体蛋白3抗体 Anti-SCP3 |
MTND4L |
神经细胞死亡诱导蛋白激酶抗体 Anti-TRIB3 |
22号染色体开放阅读框36抗体 |
大鼠泛素结合酶UBC5 elisa分析检测试剂盒 |
C22orf36 |
Rat ubiquitin-conjugating enzyme UBC5 ELISA Kit |
坏死因子诱导蛋白2(TNFα-IP 2)抗体 Anti-TNFAIP2 |
山羊骨碱性磷酸酶(BALP)elisa分析检测试剂盒 |
嗜乳脂蛋白2亚型A1抗体37LRP; P37-kDa laminin receptor precursor; MGr1-Ag; laminin receptor 1; 67kD, ribosomal protein SA; 34/67 kDa laminin receptor; 40S ribosomal protein SA; 67LR; Colon carcinoma laminin-binding protein; LAMBR; Laminin Receptor 1; LAMR 1; LAMR1; LRP; Multidrug resistance-associated protein MGr1-Ag; NEM/1CHD4; p40; Ribosomal Protein SA; RPSA; 67kD laminin receptor. |