产品名称：口蹄疫病毒基因分型荧光PCR检测试剂盒

订购信息
产品名称：口蹄疫病毒基因分型荧光PCR检测试剂盒
货号：BJ-01R5024
产品规格：50T
运输：低温
保存：负20度
有效期：一年
货期：现货

PCR反应的特异性决定因素为
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在学中zui小检出率为3个。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

【储存条件及有效期】
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】：
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
u 运输：采用或泡沫箱加冰密封进行运输。
本公司产品仅用于科研。
【自备试剂】
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。
组成及试剂配制:
1、 酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
使用方法
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）
2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括量和相对定量）和定性分析。产品仅用于科研使用
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SW-13(人肾上腺皮质癌细胞) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌细胞)曙红Y,醇溶剂红 43质量规格：AREosin Y ,alcohol solution

CM-M068小鼠肾小管平滑肌细胞完全培养基100mL曙红B质量规格：BSEosin B

CD27 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 芦丁/芸香叶苷质量规格：>97%,BRRutin

小气道上皮细胞培养基SAEpiCM-prf芦丁/芸香叶苷(标准品)质量规格：≥98%，标准品Rutin

Hela P10s-11F细胞，人细胞 小鼠神经母细胞瘤细胞与大鼠胶质瘤细胞之融合细胞,NG108-15细胞 支气管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)新橙皮苷二氢查尔酮质量规格：≥95%,BRNeosperidin dihydrochalcone
视网膜色素上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)茄尼醇（标准品）质量规格：HPLC≥97%，标准品Solanesol

GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside

tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-4B3秦皮苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Fraxin

SH-SY5Y细胞，神经母细胞瘤细胞 人胆囊癌细胞,GBC-SD细胞 CL-0048Ca Ski(人上皮细胞)5×106cells/瓶×2秦皮甲素（标准品）质量规格：≥98%，标准品Esculin

人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0氨基三乙酸（标准品）质量规格：供HPLC法杂质检查用Nitrilotriacetic acid
口蹄疫病毒基因分型荧光PCR检测试剂盒CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人细胞裂解液 (阳性对照) 十烷基基溴化500毫克2～8℃

LS174T 人结肠癌细胞5-溴-2-录嘧啶 5-Bromo-2-chloropyrimidinq 3779-36-2

MDA-MB-231人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-231 L-15+10% Hyclone FBS溶葡球菌酶100克

TDGF1 Protein Rat 重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 标签)3-录本酸25克

人羊膜细胞;WISH SGC-7901, 人胃腺癌细胞系 Human(沙氏葡糖琼脂)