ELISA包被细胞过程
日期：2025-05-02 03:09
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摘要：
ELISA包被细胞过程：
1. 在 96 孔培养板上接种细胞数为 1 x 104 cells/well ，37℃过夜培养。
2. 第2天用 PBS 洗涤培养板 2-3 次。
3. 加入 125 µl/well 10% Formalin（1:10 稀释） , 室温下固定 15 min。
4. 用 ddH2O 洗涤培养板 3 次，并晾干，储藏在 2-8oC 备用。
5. 用 PBST 洗涤 3 次，每孔加入 150 μl 1％ BSA 37 oC 封闭 1 小时。
6. PBST 洗涤 3 次后，每孔加入 100 μl 不同倍比稀释度的血清，并加入对照样
品， 37 oC 孵育 2 小时...
ELISA包被细胞过程：
1. 在 96 孔培养板上接种细胞数为 1 x 104 cells/well ，37℃过夜培养。
2. 第2天用 PBS 洗涤培养板 2-3 次。
3. 加入 125 µl/well 10% Formalin（1:10 稀释） , 室温下固定 15 min。
4. 用 ddH2O 洗涤培养板 3 次，并晾干，储藏在 2-8oC 备用。
5. 用 PBST 洗涤 3 次，每孔加入 150 μl 1％ BSA 37 oC 封闭 1 小时。
6. PBST 洗涤 3 次后，每孔加入 100 μl 不同倍比稀释度的血清，并加入对照样
品， 37 oC 孵育 2 小时。
7. PBST 洗涤 5 次后， 加入 100 μl 稀释后的 HRP 标记的二抗,37 oC 孵育 1 小时。
8. PBST 洗涤 5 次后，显色剂显色 20min 后，酶标仪上读取 A405 吸收值。
50mM 的碳酸盐包被缓冲液： 0.05mol/L pH9.6 碳酸缓冲液,4℃,保存, Na2CO3 0.15 克, NaHCO3 0.293 克,蒸馏水稀释至 100 ml。