小鼠ELISA试剂盒双抗体夹心法操作步骤
日期:2025-05-02 03:04
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摘要:
小鼠ELISA试剂盒双抗体夹心法操作步骤:
用于检测未知抗原的双抗体夹心法(eg:ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ水平)
1、包被:取空白 96 孔板,按 COA 用 PBS 稀释捕获抗体,每孔 100μl捕获抗体工作液,室温过夜;
2、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;
3、封闭:加入封闭液 200 μL/孔封闭 ELISA 板,室温孵育 1h;
4、洗板:甩去板中的封闭液体,加入洗液 350μL/孔,洗板 3 次;...
小鼠ELISA试剂盒双抗体夹心法操作步骤:
用于检测未知抗原的双抗体夹心法(eg:ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN-γ水平)
1、包被:取空白 96 孔板,按 COA 用 PBS 稀释捕获抗体,每孔 100μl捕获抗体工作液,室温过夜;
2、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;
3、封闭:加入封闭液 200 μL/孔封闭 ELISA 板,室温孵育 1h;
4、洗板:甩去板中的封闭液体,加入洗液 350μL/孔,洗板 3 次;
6、加样:取出包被封闭好的 96 孔板,分别加入 100μl标准品或稀释好的样品,标准品做复孔,室温孵育 2h;
7、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;
8、加酶标抗体:按 COA 用稀释液稀释检测抗体,每孔 100μl检测抗体工作液,室温孵育 2h;
9、洗板:每孔 350μl洗液,洗板 3 次;
10、加入底物:每孔 100μl显色液,室温避光孵育 20min,连续观察颜色变化;
11、加终止液:每孔 50μl终止液,轻柔混匀;
12、读板:检测根据酶标仪器操作方法,上机检测 OD值,通过计算获得所测物质的浓度。