新闻详情
配制过滤除 菌的细胞培养基过程
日期：2024-05-03 02:26
浏览次数：27
摘要：
温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。
1、变性温度与时间：
变性温度低，解链不wan全是导致PCR失败的*主要原...
配制过滤除 菌的细胞培养基过程:
(1) 阅读培养基使用说明，确定需要添加何种添加剂（如NaHCO3、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等）。
(2) 根据所需将培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水（20℃～30℃）将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水至总体积的95％，轻微搅拌溶解。
(3) 加入规定量的碳酸氢钠及所要添加的物质。
(4) 轻微搅拌溶解，加注射用水至规定体积。
(5) 用1 mol / L 氢氧化钠溶液或 1 mol / L 盐酸溶液调pH至所需值。
(6) 用0.22 μm滤膜正压过滤除 菌。
(7) 溶液应在2℃－8℃下避光保存。
具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。