RT（逆转录）反应合成 cDNA

日期：2025-05-02 19:16

浏览次数：120

摘要： RT（逆转录）反应合成 cDNA： 1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系） 2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。 3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），反应终体积为 20μL。 4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。 5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。

RT（逆转录）反应合成 cDNA：

1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）

2. 70℃保温 5 分钟变性模板后立即冰浴。

3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），

反应终体积为 20μL。

4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。

5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。