原代细胞培养的具体操作步骤：
1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。
2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。
3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
|
产品货号 |
P-X1674 |
产品规格 |
5×105 |
|
组织来源 |
关节骨膜组织 |
生长特性 |
贴壁 |
|
细胞形态 |
成纤维样细胞 |
产品类别 |
大鼠原代细胞 |
|
传代特性 |
见说明 |
用途 |
仅供科研 |
骨膜是覆盖在骨质表面的一层结缔组织。骨膜通过夏皮式纤维锚定在骨质上，充当外部肌肉组织和内部骨质的连接桥梁，这种结构有助于维持骨膜的完整性。
骨膜由两部分组成，外层疏松的纤维层与内层致密的细胞层，纤维层中含有成纤维细胞、胶原纤维、弹力纤维及微管等。细胞层中多为骨膜源干细胞，这种干细胞与骨髓来源的间充质干细胞类似，具有多向分化的潜能。
骨质修复、重塑和更新与骨膜中的干细胞密切相关。在正常生理状况下，骨膜组织发挥着维持骨质更新及重塑的作用，其中的干细胞既可以通过膜内成骨方式分化为成骨细胞，也可通过软骨内成骨方式分化为软骨细胞。
细胞特性：
1） 细胞来源于实验动物正常关节骨膜组织。
2) 细胞鉴定：CD90或CD73荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5) 细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 delf原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。
相关产品：
小鼠牙龈成纤维细胞 Mouse primary gingival fibroblasts
人乳腺癌细胞；MDA-MB-415
人肺动脉内皮细胞 Primary human pulmonary artery endothelial
cells; (HPAEC)
Cas9稳定表达的人宫颈癌细胞；Hela-Cas9-537
BT-474 [BT474] (人乳腺导管癌细胞)
(STR鉴定正确)
正常人胰管上皮细胞
人肺大静脉平滑肌细胞
人宫颈永生化鳞状细胞
猪骨髓间充质干细胞 Porcine bone marrow mesenchymal stem cells；BMSC
小鼠牙龈成纤维细胞 Mouse primary gingival fibroblasts
杂交瘤细胞株；WV-A-01
抗人Nigo单抗杂交瘤细胞；IF4G7-NOGO
原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：原代培养是指从生物体组织中直接分离出的细胞进行的培养。这些细胞通常来自活检样本或手术摘除的组织。原代培养的细胞尚未经过任何实验室的人工选择或适应。组织传代培养：传代培养指的是经过初次分离培养后的细胞，在体外环境中经过多次分裂和增殖后的细胞。这些细胞已经适应了人工培养条件，并可以通过传代方式多次增殖。
2. 培养过程
原代培养：原代培养的过程通常包括组织的解离、细胞的分离、种植和培养等步骤。原代细胞培养的目的是获得足够数量的细胞，以进行进一步的实验研究或建立稳定的细胞系。
传代培养：传代培养的过程涉及到将已经适应体外培养条件的细胞从培养容器中分离出来，然后重新种植到新的培养容器中进行进一步培养。传代培养通常需要在细胞达到一定密度或出现接触抑制时进行。
3. 细胞特性
原代培养：原代细胞通常具有更接近自然状态下的生物学特性，包括基因表达、酶活性、信号传导等。这些特性使得原代细胞成为研究生理和病理条件下细胞行为的重要工具。
传代培养：传代细胞由于长期在体外环境中生长，可能会发生一些生物学特性的改变。这些改变可能包括基因表达的变化、细胞形态的变异、生长速率的增加等。因此，传代细胞可能需要进行鉴定和验证，以确保其仍具有所需的生物学特性。
4.培养结果
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
传代培养：由于细胞已适应体外环境并且增殖速度快，传代培养一般适用于获得大量同种细胞以满足实验需求，如构建组织工程产品、筛选和毒性测试等。5. 应用领域
原代培养：原代细胞通常用于筛选、毒理学测试、模型研究等领域。由于其保留了生物体的自然特性，因此被认为是更接近体内条件的模型系统。
传代培养：传代细胞被广泛用于各种生物学研究，包括基因表达调控、信号转导、细胞周期调控等。传代细胞系的稳定性和一致性使得它们成为研究细胞生物学机制的理想模型。
6. 注意事项
原代培养：需要严格控制无菌条件，避免细胞污染；注意细胞的存活率和纯度，避免其他类型细胞的混杂；以及考虑细胞在体外环境下可能发生的表型和基因型改变。
传代培养：需要关注细胞的生长状态和形态变化，定期检查细胞是否存在污染或变异；注意传代次数，因为过多的传代可能导致细胞老化或转化。
公司正在出售的产品：
岩藻糖转移酶1抗体 FUT1
即用型正常兔血清 100ml
凋亡相关蛋白1抗体 RYBP
人端粒酶逆转录酶(TERT)elisa生化检测试剂盒
蛋白酶体复合物C5抗体 PRPS1L1
CYP7A1 ELISA kit
3号染色体开放阅读框36抗体 C3orf36
仓鼠细胞色素P450,家族7亚科A多肽1(CYP7A1)elisa生化检测试剂盒
血管内皮生长因子受体1抗体 VEGFR1
小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)elisa检测试剂盒
畸胎瘤衍化生长因子单克隆抗体 CRIPTO
细胞CASPASE-7蛋白表达荧光定量检测试剂盒
肌球蛋白1E抗体 MYO1E
Fcγ球蛋白IgG结合蛋白抗体 FCGBP
Prader-Willi综合征相关蛋白抗体 FSD2
钠离子通道β1抗体 SCN1B
2’,3’-环腺苷酸-3’-磷酸二酯酶抗体 CNPase
磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗体 PI3 Kinase
p110 beta
RasGTP酶激活蛋白IQGAP3抗体 IQGAP3
FITC标记小鼠CD49b单克隆抗体 mouse CD49b/FITC
四分子交联体3/四旋蛋白3/四次跨膜蛋白3抗体 TSPAN3
人HSP60 IgG抗体elisa分析检测试剂盒
小鼠绒毛膜促性腺β(β-CG)elisa分析检测试剂盒
人肺癌细胞；1125
大鼠toll样受体3(TLR3)elisa检测试剂盒
糖蛋白P43抗体 RBMX/hnRNP G
人SPARC相关模块化钙结合蛋白2(SMOC2)elisa检测试剂盒
鱼胰岛素(INS)elisa检测试剂盒免费代测
血液S-腺苷甲硫（SAM或AdoMet）酶连续循环比色法定量检测试剂盒
组织半胱-10（CASPASE-10）活性荧光定量检测试剂盒
小鼠肌苷三磷酸酶(ITPA)elisa检测试剂盒
大鼠骨膜干细胞大鼠阿立新A(Orexin A)elisa分析检测试剂盒
原代细胞培养的注意事项：
一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点：
二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。
三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。
四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。
五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。