原代细胞培养的具体操作步骤：
1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。
2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。
3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
|
产品货号 |
P-X2019 |
产品规格 |
5×105 |
|
组织来源 |
心脏组织 |
生长特性 |
贴壁 |
|
细胞形态 |
不规则细胞 |
产品类别 |
兔原代细胞 |
|
传代特性 |
见说明 |
用途 |
仅供科研 |
心脏壁主要由心肌构成，心房壁比心室壁薄。心肌的工作细胞包括心房肌和心室肌。心肌细胞为短柱状，一般只有一个细胞核，心肌细胞之间有闰盘结构。心房与心室的心肌层不直接相连，它们分别起止于心房和心室交界处的纤维支架，形成各自独立的肌性壁，从而保证心房和心室各自进行独立的收缩舒张，以推动血液在心脏内的定向流动。临床研究表明，在房颤患者心房肌细胞内，发现存在有异常增高的细胞内钙蓄积，并证实心肌细胞内钙超载在心律失常的发生中起着关键作用。此外，在房颤患者心房细胞内也发现有 CaMK Ⅱ的异常高表达。
细胞特性：
1）组织来源于实验动物的正常心脏组织。本细胞为终末分化细胞，增殖能力很弱，建议客户收到细胞后直接用于后续实验，不要进行扩增培养。
2)细胞鉴定：肌球蛋白重链(Myosin heavy chain)荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式：柱状细胞，不规则细胞，贴壁培养。
我们推荐使用 DELF 原代心肌细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
相关产品：
大鼠卵巢颗粒细胞 Rat primary ovarian granulosa cells
荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞；pCSN2-HLZ
大鼠骨骼肌成纤维细胞 Rat skeletal muscle fibroblasts
小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌)；LC-1-202
牛脂肪干细胞 Primary bovine adipose-derived stem cells
大耳山羊肺细胞
小鼠腓肠肌细胞
人小脑颗粒细胞
BRL (大鼠肝细胞) (种属鉴定正确)
大鼠卵巢颗粒细胞 Rat primary ovarian granulosa cells
大鼠骨肉瘤细胞；UMR-106
中国仓鼠卵巢细胞（亚系克隆）；CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA
原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：原代培养是指从生物体组织中直接分离出的细胞进行的培养。这些细胞通常来自活检样本或手术摘除的组织。原代培养的细胞尚未经过任何实验室的人工选择或适应。组织传代培养：传代培养指的是经过初次分离培养后的细胞，在体外环境中经过多次分裂和增殖后的细胞。这些细胞已经适应了人工培养条件，并可以通过传代方式多次增殖。
2. 培养过程
原代培养：原代培养的过程通常包括组织的解离、细胞的分离、种植和培养等步骤。原代细胞培养的目的是获得足够数量的细胞，以进行进一步的实验研究或建立稳定的细胞系。
传代培养：传代培养的过程涉及到将已经适应体外培养条件的细胞从培养容器中分离出来，然后重新种植到新的培养容器中进行进一步培养。传代培养通常需要在细胞达到一定密度或出现接触抑制时进行。
3. 细胞特性
原代培养：原代细胞通常具有更接近自然状态下的生物学特性，包括基因表达、酶活性、信号传导等。这些特性使得原代细胞成为研究生理和病理条件下细胞行为的重要工具。
传代培养：传代细胞由于长期在体外环境中生长，可能会发生一些生物学特性的改变。这些改变可能包括基因表达的变化、细胞形态的变异、生长速率的增加等。因此，传代细胞可能需要进行鉴定和验证，以确保其仍具有所需的生物学特性。
4.培养结果
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
传代培养：由于细胞已适应体外环境并且增殖速度快，传代培养一般适用于获得大量同种细胞以满足实验需求，如构建组织工程产品、筛选和毒性测试等。5. 应用领域
原代培养：原代细胞通常用于筛选、毒理学测试、模型研究等领域。由于其保留了生物体的自然特性，因此被认为是更接近体内条件的模型系统。
传代培养：传代细胞被广泛用于各种生物学研究，包括基因表达调控、信号转导、细胞周期调控等。传代细胞系的稳定性和一致性使得它们成为研究细胞生物学机制的理想模型。
6. 注意事项
原代培养：需要严格控制无菌条件，避免细胞污染；注意细胞的存活率和纯度，避免其他类型细胞的混杂；以及考虑细胞在体外环境下可能发生的表型和基因型改变。
传代培养：需要关注细胞的生长状态和形态变化，定期检查细胞是否存在污染或变异；注意传代次数，因为过多的传代可能导致细胞老化或转化。
公司正在出售的产品：
牛乳过氧化物酶(LPO)elisa分析检测试剂盒
/酵母甲羟戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法
土壤多酚氧化酶（PPO）测试盒
细胞色素P450 2F1抗体
血液过氧化氢（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量检测试剂盒
LRWD1
环指蛋白1抗体 RING1
LRWD1蛋白抗体
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)elisa检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)elisa检测试剂盒
大鼠白介素2受体(IL-2R)elisa检测试剂盒
小鼠维生素B12(VB12)elisa检测试剂盒
基质重塑相关蛋白7抗体 MXRA7
大鼠胃泌素（GAS）elisa检测试剂盒
PE标记小鼠F4/80单克隆抗体 mouse F4/80/PE
人波形蛋白（VIM）elisa检测试剂盒
1号染色体开放阅读框2抗体 C1orf2
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa分析检测试剂盒
14-3-3 sigm重组兔单克隆抗体 14-3-3 sigma
细胞色素P450亚酶CYP2B2（PROD）活性荧光定量检测试剂盒
丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗体 MAP2K1IP1
促黄体诱导蛋白抗体 StAR
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶H2抗体 PSKH2
人涎腺腺样囊性癌细胞；ACC-2
蛋氨酸氨肽酶2抗体 Methionine
Aminopeptidase 2
PEST含核蛋白抗体 PCNP
锌指蛋白90抗体 ZFP90
磷酸化转录调节因子CEBP β抗体 Phospho-CEBP
beta (Thr235)
FAM194B蛋白抗体 FAM194B
素β4抗体 Thymosin beta 4
硫酸乙酰肝素6脑苷脂转硫酸酶1抗体 HS6ST1
兔心房心肌细胞EMSY蛋白抗体 EMSY
原代细胞培养的注意事项：
一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点：
二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。
三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。
四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。
五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。