产品名称：兔室管膜细胞

原代细胞实验步骤：

以胚胎小鼠为例
1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。
2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。
3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。
4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。
注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。
5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。

组织来源	脑或脊髓组织	货号	P-X2209
产品规格	5×105	生长特性	贴壁
产品类别	兔原代细胞	细胞形态	集落，克隆球状

细胞详述：

室管膜是覆盖在各脑室、中脑水管、脊髓中央管腔面的上皮，由一层立方形、柱状或扁平上皮细胞构成，来源于胚胎时期神经管的室管膜层，是胚胎神经上皮的物。

神经干细胞是存在于哺乳动物体内的一种具有多向分化潜能和自我更新能力的细胞，能分化为神经元和神经胶质细胞，其在神经系统中的替代前景广阔。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常脑或脊髓组织。

2）细胞鉴定：Nestin荧光染色为阳性。

3）经鉴定细胞纯度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5）细胞生长方式：集落，克隆球状，半贴壁半悬浮培养。

我们推荐使用 DELF 原代神经干细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

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注意事项：

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。