产品名称：人食管癌相关成纤维细胞

原代细胞实验步骤：

以胚胎小鼠为例
1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。
2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。
3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。
4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。
注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。
5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。

组织来源	人食管癌组织	货号	P-X1325
产品规格	5×105	生长特性	贴壁
产品类别	人原代细胞	细胞形态	不规则细胞

细胞详述：

食管癌是世界常见的六大恶性肿瘤之一，而我国是高发区之一。食管癌是发生在食管上皮组织的恶性肿瘤。细胞主要呈多角形，大小不等，胞浆丰富，胞核呈圆形或卵圆形，大小不等。此外，有研究表明，大部分来自于上皮的肿瘤细胞中均存在角蛋白。

肿瘤相关成纤维细胞是肿瘤微环境中主要的细胞成分之一，在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。

细胞特性：

1）细胞来源于人食管癌组织。

2）细胞鉴定：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。

3）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

4）细胞生长方式：长梭形，不规则细胞，贴壁培养。

我们推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

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注意事项：

1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。