本产品于科学研究实验使用、不得用于其它。
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组织来源 |
脑 |
货号 |
P-X2205 |
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产品规格 |
5×105 |
生长特性 |
贴壁 |
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产品类别 |
兔原代细胞 |
细胞形态 |
神经元细胞样 |
细胞简介：
兔下丘脑神经元细胞分离自下丘脑；下丘脑又称丘脑下部，位于大脑腹面、丘脑的下方，是调节内脏活动和活动的较神经所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部（又名视前区和视上区）﹑中部（结节区）和后部（体区）。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系，可以接受很多神经冲动，为系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能，合成神经垂体及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养，建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。
方法简介：
实验室分离的兔下丘脑神经元细胞采用胰蛋白酶消化法结合神经元培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔下丘脑神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml）
培养基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：神经元细胞样
传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液：0.25%胰蛋白酶
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
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原代细胞实验步骤：
以胚胎小鼠为例
1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的器械。后取出双角置于无菌平皿内。
2．用Hanks液洗涤3次，剪开取出胚胎。血液和筋膜等组织。
3．用弯头剪把胚胎尽量剪碎，每个组织块小于1mm3。在操作时应尽量将平皿盖半盖住平皿以防空气中尘埃落下污染组织。再用Hanks液洗涤2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按两种方法进行，即消化法和组织块培养法。
4．若使用消化法，则将组织块放人三角烧瓶内加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力搅拌消化20多min。然后加入少量血清终止消化。用几层无菌纱布过滤。取过滤液，800r/min离心5~10min收集细胞。弃上清，加入带有双抗的培养基，放入培养瓶中培养。
注：细胞分离的方法各实验室不同，所采用的消化酶也不相同（如胶原酶，透明质酶等）。
5．若进行组织块培养，则不做步骤4，加入几滴血清于组织块中，再用弯头吸管将组织块悬液吸起。在一小培养瓶中逐个铺展开，注意将瓶底涂抹均匀。将瓶子翻转倒置后在37℃培养箱内放置2－3h。待组织块微干与瓶壁粘牢后再轻轻将瓶子翻转过来，从边角加入4~5mL培养基，使细胞接触到培养基，放培养箱内继续进行培养。
注意事项：
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中，有任何问题可联系我们在线客服。
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