原代细胞培养的具体操作步骤：
1.组织处理：将动物组织从机体中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶处理，使其分散成单个细胞。
2.细胞计数：使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数，确保细胞密度适中。
3.接种培养：将细胞悬液接种到培养瓶中，加入适量的培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
4.换液和传代：定期更换培养液，当细胞达到一定密度时进行传代培养，以维持细胞的生长状态。
产品货号
P-X2015
产品规格
5×105
组织来源
肺组织
生长特性
贴壁
细胞形态
成纤维细胞样
产品类别
兔原代细胞
传代特性
可传5代左右；3代以内状态佳
用途
仅供科研
兔肺成纤维细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持肺器官的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
公司实验室分离的兔肺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
公司实验室分离的兔肺成纤维细胞经Vimentin荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
相关产品：
|
小鼠腹腔巨噬细胞 Primary mouse peritoneal macrophages |
非何杰金氏瘤细胞；Wein 133 |
|
人眼眶成纤维细胞 Human primary orbital fibroblasts |
人膀胱鳞癌细胞；SCaBER |
|
MuM-2C (人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞) |
人内膜癌细胞 |
|
小鼠内膜上皮细胞 |
人肺巨细胞癌高转移细胞株 |
|
TCCSUP (人膀胱癌细胞) (STR鉴定正确) |
小鼠腹腔巨噬细胞 Primary mouse peritoneal macrophages |
|
小鼠杂交瘤细胞；HB (Balb/c X NS1/1) JT1-D7 (FERM BP-1684) |
小鼠杂交瘤细胞；HB JDSHCNS4-93 |
原代培养与传代培养的区别：
1. 细胞来源
原代培养：原代培养是指从生物体组织中直接分离出的细胞进行的培养。这些细胞通常来自活检样本或手术摘除的组织。原代培养的细胞尚未经过任何实验室的人工选择或适应。组织传代培养：传代培养指的是经过初次分离培养后的细胞，在体外环境中经过多次分裂和增殖后的细胞。这些细胞已经适应了人工培养条件，并可以通过传代方式多次增殖。
2. 培养过程
原代培养：原代培养的过程通常包括组织的解离、细胞的分离、种植和培养等步骤。原代细胞培养的目的是获得足够数量的细胞，以进行进一步的实验研究或建立稳定的细胞系。
传代培养：传代培养的过程涉及到将已经适应体外培养条件的细胞从培养容器中分离出来，然后重新种植到新的培养容器中进行进一步培养。传代培养通常需要在细胞达到一定密度或出现接触抑制时进行。
3. 细胞特性
原代培养：原代细胞通常具有更接近自然状态下的生物学特性，包括基因表达、酶活性、信号传导等。这些特性使得原代细胞成为研究生理和病理条件下细胞行为的重要工具。
传代培养：传代细胞由于长期在体外环境中生长，可能会发生一些生物学特性的改变。这些改变可能包括基因表达的变化、细胞形态的变异、生长速率的增加等。因此，传代细胞可能需要进行鉴定和验证，以确保其仍具有所需的生物学特性。
4.培养结果
原代培养：所获得的细胞在形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大，更接近于生物体内的生活状态。这种培养方法常用于研究细胞在生理状态下的生长、代谢和繁殖。
传代培养：由于细胞已适应体外环境并且增殖速度快，传代培养一般适用于获得大量同种细胞以满足实验需求，如构建组织工程产品、筛选和毒性测试等。5. 应用领域
原代培养：原代细胞通常用于筛选、毒理学测试、模型研究等领域。由于其保留了生物体的自然特性，因此被认为是更接近体内条件的模型系统。
传代培养：传代细胞被广泛用于各种生物学研究，包括基因表达调控、信号转导、细胞周期调控等。传代细胞系的稳定性和一致性使得它们成为研究细胞生物学机制的理想模型。
6. 注意事项
原代培养：需要严格控制无菌条件，避免细胞污染；注意细胞的存活率和纯度，避免其他类型细胞的混杂；以及考虑细胞在体外环境下可能发生的表型和基因型改变。
传代培养：需要关注细胞的生长状态和形态变化，定期检查细胞是否存在污染或变异；注意传代次数，因为过多的传代可能导致细胞老化或转化。
公司正在出售的产品：
试剂
|
EPS15 |
豚鼠白介素4(IL-4)elisa分析检测试剂盒 |
|
β2TFELISAKit |
C19orf25 |
|
人β2转铁蛋白(β2TF)elisa分析检测试剂盒 |
19号染色体开放阅读框25抗体 |
|
细胞信号转导分子SMAD3抗体 Anti-Smad3 |
MASS1/GPR98 |
|
胞吞调控蛋白Eps15抗体 |
G蛋白偶联受体98抗体 |
|
Rabbit Anti-Chicken IgM / Cy7 |
IL-4ELISAKit |
|
Cy7标记的兔抗鸡IgM |
猪白介素17(IL-17)elisa分析检测试剂盒 |
|
Toll样受体7抗体 Anti-TLR7 |
CAM ELISA Kit |
|
神经纤毛蛋白1抗体 Anti-NRP1/CD304 |
大鼠钙调素(CAM)elisa分析检测试剂盒 |
|
癌基因RAS相关蛋白Rab4A抗体 Anti-RAB4 |
PorcineIL-17ELISAKit |
|
EXOC3L4蛋白抗体 |
小鼠可溶性补体激活产物SC5b9 elisa检测试剂盒 |
|
MSH3 |
仓鼠谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)elisa分析检测试剂盒 |
|
错配修复蛋白3抗体 |
EXOC3L4 |
|
犬白介素1(IL-1)elisa分析检测试剂盒 |
GPX3 ELISA kit |
|
石蜡切片组织高碘酸希尔（PAS）法染色试剂盒 |
大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)elisa分析检测试剂盒 |
|
人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)elisa分析检测试剂盒 |
兔肺成纤维细胞HumanBIRC4ELISAkit |
原代细胞培养的注意事项：
一、在进行原代细胞培养时，需要注意以下几点：
二、无菌操作：整个过程需要在无菌条件下进行，以防止污染。
三、细胞融合和传代：跟踪细胞的融合状态，适时进行传代，避免细胞分化。
四、冷冻保存和复苏：对于需要长期保存的细胞，可以进行冷冻保存，并注意复苏时的操作细节。
五、培养基的选择和更换：根据细胞类型选择合适的培养基，并定期更换以保证营养充足。