一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006505 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006505 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006505 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Cmtm2b
中文名称:趋化素样因子超家族成员2抗体
别 名;CLF2B_MOUSE; CKLF-like MARVEL transmembrane
domain-containing protein 2B; Chemokine-like factor superfamily member 2B;
1700013O04Rik; Cklfsf22; Cklfsf2b.
研究领域; 细胞生物 发育生物学 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Mouse, Rat, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;24kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from mouse Cmtm2b: 151-210/210
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MouseoxyntomodulinELISAKit |
小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)elisa检测试剂盒 |
大鼠凋亡诱导因子(AIF)elisa分析检测试剂盒 |
貂环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒免费代测 |
AIF ELISA Kit |
MUTED蛋白抗体 |
山羊补体蛋白3(C3)elisa分析检测试剂盒 |
MUTED |
信号通路WNT10B抗体 Anti-WNT12/WNT10B |
位素法DNA斑点杂交试剂盒 |
C3ELISAKit |
FAM47E蛋白抗体 |
硝基化α-突触核蛋白 Anti-nitrated Alpha-synuclein (nitro-Tyr39) |
FAM47E |
Rab溶酶体相互作用蛋白样2抗体 Anti-RILPL2 |
RAN GTPase酶激活蛋白1抗体 Anti-RanGAP1 |
凝血酶(凝血因子II)激活肽2抗体 Anti-Thrombin Activation peptide fragment 2 |
磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 Anti-Phospho-NFKB1(Ser932) |
蝌蚪雌二醇(E2)elisa分析检测试剂盒 |
TUB蛋白抗体 Anti-TUB 1 |
E2 ELISA kit |
Smad4抗体 Anti-Smad4 |
人蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)elisa分析检测试剂盒 |
Cy5标记的兔抗小鼠IgG H&L-Fc |
HumanPGP9.5ELISAKit |
Rabbit Anti-Mouse IgG Fc / Cy5 |
通用型赖(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 |
乙基丙二酸脑病蛋白抗体 |
趋化素样因子超家族成员2抗体3-galactosyltransferase 3; 3-GalNAc-T1; 3-GalTase 3; 3-N-acetylgalactosaminyltransferase 1; 3-N-acetylgalactosaminyltransferase; b3Gal T3; b3Gal-T3; B3galnt1; B3GALT3; B3GL1_HUMAN; Beta 1,3 galactosyltransferase 3; Beta 1,3 GalTase 3; beta 1,3 N acetylgalactosaminyltransferase 1 (globoside blood group); Beta 3 GalNAc T1; Beta 3 Gx T3; Beta-1; Beta-3-Gx-T3; beta3Gal T3; Beta3Gal-T3; Beta3GalT3; brainiac1; Galactosylgalactosylglucosylceramide beta D acetyl galactosaminyltransferase; Galactosylgalactosylglucosylceramide beta-D-acetyl-galactosaminyltransferase; galT3; Gb4Cer; GLCT3; GLOB; Globoside synthase; globotriaosylceramide 3 beta N acetylgalactosaminyltransferase; P antibody P antigen synthase; P blood group globoside; P1 antibody UDP Gal:betaGlcNAc beta 1,3 galactosyltransferase 1; UDP Gal:betaGlcNAc beta 1,3 galactosyltransferase, polypeptide 3 (Globoside blood group); UDP GalNAc:beta 1,3 N acetylgalactosaminyltransferase 1; UDP GalNAc:betaGlcNAc beta 1,3 galactosaminyltransferase, polypeptide 1 (Globoside blood group); UDP N acetylgalactosamine:globotriaosylceramide beta 1,3 N acetylgalactosaminyltransferase; UDP-GalNAc:beta-1; UDP-N-acetylgalactosamine:globotriaosylceramide beta-1. |