一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013928 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013928 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013928 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:RNF216
中文名称:锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体
别 名;E3 ubiquitin ligase TRIAD3; TRIAD3; ring finger protein 216; Triad domain-containing protein 3; U7I1; UBCE7IP1; Ubiquitin conjugating enzyme 7 interacting protein 1; UiP83; ZIN; Zinc finger protein inhibiting NF kappa B; RN216_HUMAN.
研究领域;细胞生物 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;99kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human TRIAD3: 301-400/866
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Isoform 1 acts as an E3 ubiquitin ligase, which accepts ubiquitin from specific E2 ubiquitin-conjugating enzymes, and then transfers it to substrates promoting their degradation by the proteasome. Promotes degradation of TRAF3, TLR4 and TLR9. Contributes to the regulation of antiviral responses. Down-regulates activation of NF-kappa-B, IRF3 activation and IFNB production. Isoform 3/ZIN inhibits TNF and IL-1 mediated activation of NF-kappa-B. Promotes TNF and RIP mediated apoptosis.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
人肝细胞生长因子激活物(HGFA)elisa分析检测试剂盒 |
蛋白赖氨酸-6-氧化酶抗体 LOX |
黄体生成素(LH)elisa分析检测试剂盒 |
锌指蛋白639抗体 ZNF639 |
细胞丙二醛(MDA)比色法定量检测试剂盒 |
PE标记人CD5单克隆抗体 human CD5/PE |
小鼠骨钙素(BGP)elisa检测试剂盒 |
PTCD2蛋白抗体 PTCD2 |
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒 |
信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2抗体 WD SOCS box protein 2 |
大鼠白介素17(IL-17)elisa检测试剂盒 |
受体表达蛋白5/息肉相关蛋白抗体 REEP5 |
小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)elisa检测试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Nek11抗体 NEK11 |
石蜡切片组织CASPASE-6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
肌肉特异性蛋白MYOZ2抗体 Myozenin 2 |
大鼠胰岛素样因子3(INSL3)elisa检测试剂盒 |
组蛋白去甲基化酶JMJ2A抗体 JMJD2A |
FA83D蛋白抗体 FA83D |
活化T细胞核因子5蛋白抗体 NFAT5 |
FasL(CD178)抗体 Fas Ligand |
22号染色体开放阅读框25抗体 C22orf25 |
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 phospho-AMPK alpha-1 (Thr183) |
组织乙酰化组蛋白H4染色质沉淀分析(CHIP)试剂盒 |
磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 phospho-ATG4A (Ser100) |
小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析检测试剂盒 |
代谢型谷氨酸受体1A抗体 GRM1 |
大鼠载脂蛋白A1(Apo-A1)elisa检测试剂盒 |
锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体6-bisphosphatase 1; 6-bisphosphate 1-phosphohydrolase 1; D fructose 1 6 bisphosphate 1 phosphohydrolase 1; D-fructose-1; EC 3.1.3.11; F16P1_HUMAN; FBP; FBP 1; FBP1; FBPase 1; Fructose 1 6 bisphosphatase 1; Fructose bisphosphatase 1; Fructose-1; Growth inhibiting protein 17; Liver fructose bisphosphatase. |