一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005256 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005256 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005256 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:Cardiac Troponin T
中文名称:心肌特异性肌钙蛋白T抗体
别 名;Cardiac muscle troponin T; Cardiomyopathy dilated 1D (autosomal dominant); Cardiomyopathy hypertrophic 2; CMD1D; CMH2; CMPD2; cTnT; LVNC6; MGC3889; OTTHUMP00000033864; OTTHUMP00000033865; OTTHUMP00000033866; OTTHUMP00000033867; OTTHUMP00000033870; OTTHUMP00000218095; RCM3; TNNT 2; TNNT2; TNNT2_HUMAN; TnTC; Troponin T cardiac muscle; Troponin T type 2 (cardiac); Troponin T type 2 cardiac; Troponin T, cardiac muscle; Troponin T2; Troponin T2 cardiac.
研究领域;心血管 学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;36kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Cardiac Troponin T: 201-298/298
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Troponin T is the tropomyosin-binding subunit of troponin, the thin filament regulatory complex which confers calcium-sensitivity to striated muscle actomyosin ATPase activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MCP-5ELISAKit |
(含HRP二抗) |
鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠次级组织趋化因子6Ckine(CCL21)elisa检测试剂盒 |
SCT ELISA kit |
环指蛋白187抗体 |
人胆固醇酯转移蛋白(CETP)elisa分析检测试剂盒 |
RNF187 |
锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体 Anti-ZADH1 |
大鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)elisa检测试剂盒 |
HumanCETPELISAKit |
CGG结合蛋白1抗体 |
尼曼匹克C2前体蛋白抗体 Anti-NPC2/Niemann Pick C2 |
CGGBP1 |
环指蛋白36抗体 Anti-RNF36 |
胞质分裂调控蛋白1抗体 Anti-PRC1 |
神经突触相关蛋白SLITRK2抗体 Anti-SLITRK2 |
原钙粘蛋白γA9抗体 Anti-PCDHGA9 |
钾离子通道蛋白15抗体 |
线粒体二羧酸载体蛋白11抗体 Anti-SLC25A11 |
KCNK15 |
泛素蛋白连接酶D1抗体 Anti-UBE2D1 |
Rho鸟甘酸转运蛋白抗体 |
胶体金标记的兔抗人IgM |
ARHGEF11 |
Rabbit Anti-Human IgM / Gold |
蛋白质羰基测试盒测血清、组织 100管/50样 50管/25样 紫外比色法 |
锌指蛋白100抗体 |
心肌特异性肌钙蛋白T抗体RORG_HUMAN; Nuclear receptor ROR-gamma; ROR Gamma; NR1F3; RZRG; TOR; IMD42; RZR-GAMMA; Nuclear receptor RZR-gamma; Nuclear receptor subfamily 1 group F member 3; RAR-related orphan receptor C; Retinoid-related orphan receptor-gamma; ROR gamma T [Mus musculus]; nuclear receptor ROR-gamma isoform 2; RORgT; |