一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004385 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004385 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004385 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:ABCA1
中文名称:腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体
别 名;ABC1; ATP binding cassette transporter A1; ABC 1; ABC Transporter 1; ABCA 1; ATP binding Cassette 1; ATP binding cassette sub family A ABC1 member 1; ATP binding cassette sub family A member 1; ATP binding cassette sub-family A member 1; ATP binding Cassette Transporter 1; ATP-binding Cassette 1; ATP-binding Cassette Transporter 1; CERP; Cholesterol Efflux Regulatory Protein; FLJ14958; HDLDT1; Membrane bound; MGC164864; MGC165011; TD; TGD; ABCA1_HUMAN.
信号转导 转录调节因子 转运蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, (predicted: Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;254kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCA1: 501-600/2261 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
cAMP-dependent and sulfonylurea-sensitive anion transporter. Key gatekeeper influencing intracellular cholesterol transport.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
小鼠白介素31(IL-31)elisa检测试剂盒 |
叉头蛋白S1抗体 FOXS1 |
人醛固酮(ALD)elisa检测试剂盒 |
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗体 AMPK gamma 1 |
酵母菌YNB培养基 |
OTUD1蛋白抗体 OTUD1 |
鱼球蛋白A(IgA)elisa分析检测试剂盒 |
PE-Cy5标记人CD55单克隆抗体 human CD55/PE-Cy5 |
小鼠纤溶酶原激活剂抑制物(PAI-1)elisa检测试剂盒 |
锌指蛋白142抗体 ZNF142 |
大鼠双氢睾酮(DHT)elisa检测试剂盒 |
神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体 C1orf76 |
大鼠白三烯C4(LTC4)elisa分析检测试剂盒 |
神经元核抗原抗体 NeuN |
人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)elisa检测试剂盒 |
黑色素瘤相关突变抗原1样蛋白1抗体 MUM1L1 |
冰冻切片淀粉样蛋白(AMYLOID)染色试剂盒 |
转化生长因子β活化激酶1 TAK1 |
DNAJC11蛋白抗体 DNAJC11 |
核糖核酸结合蛋白2抗体 PTBP2 |
D型-过氧化酶活化受体抗体 PPAR delta + beta |
自噬相关蛋白9B抗体 ATG9B |
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 phospho-CaMK2 alpha (Tyr230) |
大鼠过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)elisa检测试剂盒 |
磷酸化酶激酶γ1 PHKG1 |
小鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)elisa分析检测试剂盒 |
表皮细胞表面抗原1/Esa1抗体 Flotillin 2 |
人Rho GDP解离抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)elisa检测试剂盒 |
腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体185 kDa Golgi coiled-coil protein; CLL-associated antigen KW-11; CTCL tumor antigen se1-1; GCC protein, 185 kD; GCC185; GCC2; GCC2_HUMAN; Golgi coiled coil protein GCC185; GRIP and coiled coil domain containing 2; GRIP and coiled-coil domain-containing protein 2; KIAA0336; OTTHUMP00000217161; Ran-binding protein 2-like 4; RanBP2L4; REN53; Renal carcinoma antigen NY-REN-53. |