一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ014201 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ014201 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ014201 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:UCP-1
中文名称:线粒体脱偶连蛋白1抗体
别 名;Uncoupling Protein-1; UCP1; UCP 1; Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1; mitochondrial brown fat uncoupling protein; SLC25A7; Thermogenin; UCP 1; UCP; Uncoupling protein 1; UCP1_HUMAN.
研究领域; 神经生物学 信号转导 线粒体
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 Flow-Cyt=1μg /test
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;33kDa
细胞定位;细胞浆 线粒体
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human UCP-1: 101-200/307
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
UCP are mitochondrial transporter proteins that create proton leaks across the inner mitochondrial membrane, thus uncoupling oxidative phosphorylation from ATP synthesis. As a result, energy is dissipated in the form of heat.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
PAELISAKit |
大鼠神经营养因子4(NT4)elisa检测试剂盒 |
大鼠白介素10(IL-10)elisa分析检测试剂盒 |
线虫补骨脂素(4-trimethylpsoralen)诱导突变试剂盒 |
IL-10 ELISA KIT |
钠/钾转运ATP酶相互作用蛋白4抗体 |
人环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒 |
NKAIN4 |
大鼠叉头框蛋白O1(FOXO1)elisa检测试剂盒 |
豚鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa分析检测试剂盒 |
cAMPELISAKit |
G蛋白偶联受体LOC51210蛋白抗体 |
小鼠基质金属蛋白酶2(MMP2)elisa检测试剂盒 |
GPCR LOC51210 |
骨髓样品固着液(Helly或B5或Lowy FMA固着液) |
桩蛋白Paxillin抗体 Anti-Paxillin |
总胆固醇TC测定试剂盒单试剂GPO-PAP法 100管/96样 比色法 |
蛋白酶体PSMα4/20S Proteasome α4抗体 Anti-PSMA4 |
鱼白介素8(IL-8/CXCL8)elisa分析检测试剂盒 |
T细胞白血病源蛋白2抗体 Anti-TLX2 |
IL-8 ELISA Kit |
液泡蛋白分选受体SORCS抗体 Anti-SORCS1 |
人丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒 |
PE-Cy3标记的兔抗犬IgM抗体 |
MDAELISAKit |
Rabbit Anti-Dog IgM / PE-Cy3 |
鱼白介素12(IL-12)elisa检测试剂盒 |
FAM58A蛋白抗体 |
线粒体脱偶连蛋白1抗体Interferon induced GTP binding protein Mx2; Interferon regulated resistance GTP binding protein MXB; Interferon-induced GTP-binding protein Mx2; Interferon-regulated resistance GTP-binding protein MxB; MX 2; MX dynamin like GTPase 2; Mx2; MX2_HUMAN; MXB; Myxovirus (influenza virus) resistance 2; Myxovirus resistance 2; Myxovirus resistance protein 2; p78 related protein; p78-related protein; Second interferon induced protein p78. |