一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ003804 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ003804 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ003804 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:ACOT8
中文名称:酰基辅酶A硫酯酶8
别 名;ACTEIII; Acot8; ACOT8_HUMAN; acyl CoA thioesterase 8; Acyl-CoA thioesterase 8; Acyl-coenzyme A thioesterase 8; Choloyl coenzyme A thioesterase; Choloyl-coenzyme A thioesterase; hACTE III; hACTE-III; hACTEIII; HIV Nef associated acyl CoA thioesterase; HIV-Nef-associated acyl-CoA thioesterase; HNAACTE; hTE; Long chain fatty acyl CoA hydrolase; Palmitoyl CoA hydrolase; Peroxisomal acyl CoA thioesterase 1; Peroxisomal acyl coenzyme A thioester hydrolase 1; Peroxisomal acyl-coenzyme A thioester hydrolase 1; Peroxisomal long chain acyl CoA thioesterase 1; Peroxisomal long-chain acyl-CoA thioesterase 1; PTE 1; PTE 2; PTE-1; PTE-2; PTE1; PTE2; Thioesterase II.
研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 病毒 细胞类型标志物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;36kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACOT8: 31-130/319
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Acyl-CoA thioesterases are a group of enzymes that catalyze the hydrolysis of acyl-CoAs to the free fatty acid and coenzyme A (CoASH), providing the potential to regulate intracellular levels of acyl-CoAs, free fatty acids and CoASH. May mediate Nef-induced down-regulation of CD4. Major thioesterase in peroxisomes. Competes with BAAT (Bile acid CoA: amino acid N-acyltransferase) for bile acid-CoA substrate (such as chenodeoxycholoyl-CoA). Shows a preference for medium-length fatty acyl-CoAs (By similarity). May be involved in the metabolic regulation of peroxisome proliferation.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠胞外铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)elisa检测试剂盒 |
环指蛋白93抗体 Anti-RNF93/ZNF178 |
白介素-22抗体 |
细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 Anti-NFKB1/p50 |
IL-22 |
TRIM35蛋白抗体 |
1号染色体开放阅读框181抗体 |
TRIM35 |
组织HSV(HERPES SIMPLX)病毒定性检测试剂盒 |
突触小泡膜蛋白源样蛋白1抗体 Anti-VAT1L/KIAA1576 |
C1orf181 |
线粒体核糖体蛋白S2抗体 |
人蛋白 DJ-1(PARK7)elisa分析检测试剂盒 |
MRPS2 |
鸭环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒 |
末端多聚腺苷酸2蛋白抗体 Anti-OGFOD2 |
大鼠法尼酯X受体(FXR)elisa检测试剂盒 |
蛋白甘露糖基转移酶1抗体 Anti-POMT1 |
有丝分裂驱动蛋白样1重组兔单克隆抗体 |
细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体 Anti-SOCS3 |
MKLP1 |
转录因子THOC2抗体 Anti-THOC2 |
双特异性磷酸酶抗体16抗体 |
大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)elisa分析检测试剂盒 |
DUSP16 |
BALP ELISA Kit |
甲状腺受体相关蛋白3抗体 Anti-Thrap3/TRAP150 |
兔CD4分子(CD4)elisa分析检测试剂盒 |
酰基辅酶A硫酯酶8FOXA2_HUMAN; Hepatocyte nuclear factor 3-beta; HNF-3-beta; HNF-3B; Forkhead box protein A2; Transcription factor 3B (TCF-3B); HNF3B, TCF3B; |