一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010110 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010110 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010110 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:IFT122
中文名称:细胞纤毛内转运同源蛋白122抗体
别 名;CED; IF122_HUMAN; IFT122; Intraflagellar transport 122 homolog (Chlamydomonas); Intraflagellar transport protein 122 homolog; SPG; WD repeat domain 10; WD repeat-containing protein 10; WD repeat-containing protein 140; WDR10; WDR10p; WDR140.
研究领域;细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;142kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human IFT122: 1-100/1241
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Required for cilia formation during neuronal patterning. Acts as a negative regulator of Shh signaling. Required to recruit TULP3 to primary cilia (By similarity).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
NRG4ELISAkit |
通用型青枯菌/茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum;Rs) |
大鼠白血病抑制因子(LIF)elisa分析检测试剂盒 |
通用型组织/细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 |
LIF ELISA Kit |
伴肌动蛋白抗体 |
人基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa分析检测试剂盒 |
Nebulin |
小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体 elisa分析检测试剂盒 |
大鼠组胺H3受体(HRH3)elisa检测试剂盒 |
HumanTIMP-2ELISAKit |
Gastrokine 2蛋白抗体 |
大鼠白介素10(IL-10)elisa检测试剂盒 |
Gastrokine 2 |
人Toll样受体5(TLR5)elisa检测试剂盒 |
磷酸化p21激活激酶3抗体 Anti-phospho-PAK3(Ser139) |
纯化溶酶体酸性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒 |
八聚体结合转录因子6抗体 Anti-OCT6 |
鱼去甲肾上腺素(NE)elisa分析检测试剂盒 |
脱中胚蛋白抗体 Anti-TBR2/Eomes |
NE ELISA kit |
Snail蛋白抗体 Anti-Snail/SNAI 1 |
人层粘连蛋白亚基γ-2(LAMC2)elisa分析检测试剂盒 |
碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗人IgM |
HumanLAMC2ELISAKit |
Rabbit Anti-Human IgM / AP |
土壤酸性木聚糖酶测试盒/土壤酸性半纤维素酶测试盒 |
FAM162A蛋白抗体 |
细胞纤毛内转运同源蛋白122抗体CAB27; CALB 1; CALB; CALB1; Calbindin 1 28kDa; Calbindin-D-28K; Calbindin D28; D 28K; D28K; Vitamin D dependent calcium binding protein; Vitamin D dependent calcium binding protein avian type; Vitamin D dependent calcium binding protein avian-type; Vitamin D-dependent calcium-binding protein; CALB1_HUMAN. |