一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006498 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006498 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006498 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:CYP3A4
中文名称:细胞色素P450 3A4抗体
别 名;Cytochrome p450 3A4; CP33; CP34; CYP3A; CYP3A3; CYP3A4; CYPIIIA4; CYPIIIA3; Cytochrome P450 family 3 subfamily A polypeptide 4; Cytochrome P450 subfamily IIIA polypeptide 4; Glucocorticoid inducible P450; HLP; MGC126680; NF 25; NF25; P450 III steroid inducible; P450 PCN1; P450C3; P450PCN1; Quinine 3 monooxygenase; Taurochenodeoxycholate 6 alpha hydroxylase; CP3A4_HUMAN; 1,8-cineole 2-exo-monooxygenase; Albendazole monooxygenase; Albendazole sulfoxidase; Cytochrome P450 3A3; Cytochrome P450 HLp; Cytochrome P450 NF-25; Cytochrome P450-PCN1; Nifedipine oxidase; Quinine 3-monooxygenase; Taurochenodeoxycholate 6-alpha-hydroxylase.
研究领域; 细胞生物 新陈代谢 线粒体
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Guinea Pig, )
产品应用;WB=1:500-2000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1ug/test IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;55kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜 线粒体
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CYP3A4: 18-120/503
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Cytochromes P450 are a group of heme-thiolate monooxygenases. In liver microsomes, this enzyme is involved in an NADPH-dependent electron transport pathway. It performs a variety of oxidation reactions (e.g. caffeine 8-oxidation, omeprazole sulphoxidation, midazolam 1'-hydroxylation and midazolam 4-hydroxylation) of structurally unrelated compounds, including steroids, fatty acids, and xenobiotics. The enzyme also hydroxylates etoposide.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MHCELISAKit |
大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)elisa检测试剂盒 |
猴肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa分析检测试剂盒 |
体液HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性检测试剂盒 |
TNF-α ELISA KIT |
细胞膜钙ATP酶4抗体 |
人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)elisa分析检测试剂盒 |
PMCA4 |
甘露糖待测样品处理试剂盒 |
豚鼠白介素6(IL-6)elisa分析检测试剂盒 |
HumanSP-CELISAKit |
热休克蛋白27家族蛋白3抗体 |
人胃泌素释放肽前体(ProGRP)elisa检测试剂盒 |
HSPB3 |
猪输血传播病毒/辛型肝炎病毒抗体(IgG)elisa检测试剂盒免费代测 |
胰腺抗体 Anti-PPY/Pancreatic hormone |
大鼠金属硫蛋白2(MT-2)elisa分析检测试剂盒 |
PELO蛋白抗体 Anti-PELO |
白介素11受体α/IL-11Rα抗体 |
未分化胚胎干细胞转录因子1抗体 Anti-UTF1 |
IL-11RA |
线粒体乙酰化酶3抗体 Anti-SIRT3 |
1号染色体开放阅读框147抗体 |
PE-Cy7标记的羊抗大鼠IgG H&L |
C1orf147 |
Goat Anti-Rat IgG H&L / PE-Cy7 |
羊生长分化因子9(GDF9)elisa检测试剂盒 |
Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白4抗体 |
细胞色素P450 3A4抗体KIAA1650; Proline rich synapse associated protein 2; Proline-rich synapse-associated protein 2; ProSAP2; PSAP2; SH3 and multiple ankyrin repeat domains 3; SH3 and multiple ankyrin repeat domains protein 3; SH3/ankyrin domain gene 3; SHAN3_HUMAN; Shank postsynaptic density protein; Shank3; Shank3b; SPANK 2; SPANK2. |