一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006419 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006419 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006419 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:CK14+17+42+10
中文名称:细胞角蛋白14抗体
别 名;Cytokeratin 14; CK 14; ck14; Cytokeratin14; Cytokeratin-14; Dowling Meara; ebs3; Epidermolysis bullosa simplex; k14; Keratin 14; Keratin type I cytoskeletal 14; Keratin14; Koebner; Krt 14; krt14; EBS3; EBS4; NFJ; Keratin, type I cytoskeletal 14; Cytokeratin 17; CK 17; ck17; Cytokeratin17; Cytokeratin-17; Keratin, type I cytoskeletal 17; Cytokeratin 10; CK 10; ck10; Cytokeratin10; Cytokeratin-10; Keratin, type I cytoskeletal 10; Cytokeratin 42; CK 42; ck42; Cytokeratin42; Cytokeratin-42; Keratin, type I cytoskeletal 42; K1C14_HUMAN.
研究领域; 细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000 IHC-P=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;52kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK14+17+42+10: 411-472/472
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The nonhelical tail domain is involved in promoting KRT5-KRT14 filaments to self-organize into large bundles and enhances the mechanical properties involved in resilience of keratin intermediate filaments in vitro.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
IL-6ELISAKIT |
肿瘤血管内皮调节蛋白Robo4抗体 Anti-Robo4 |
鱼葡萄糖激酶(GCK)elisa分析检测试剂盒 |
生殖细胞增殖相关蛋白NANOS2抗体 Anti-NANOS2 |
GCK ELISA kit |
粘蛋白样蛋白1抗体 |
人层粘连蛋白-5(LN-5)elisa分析检测试剂盒 |
SBEM |
GC(气相)试剂盒 |
锌指蛋白BED4抗体 Anti-ZBED4 |
LN-5ELISAKit |
神经细胞特异性转录因子LDB1抗体 |
小鼠白介素1受体Ⅰ(IL1R1)elisa检测试剂盒 |
LDB1 |
细胞线粒体复合物V蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
神经丛蛋白A4抗体 Anti-Plexin A4 |
大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)elisa检测试剂盒免费代测 |
多腺苷二磷酸多聚酶16抗体 Anti-PARP16 |
赖氨酸N甲基转移酶1B抗体 |
细胞外基质蛋白2抗体 Anti-SPARCL1/Ecm2 |
KMT1B |
Toll样受体9抗体 Anti-TLR9/CD289 |
细胞骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体 |
链霉亲和素 |
CKAP2 |
Rabbit Anti-human IgG / Streptavidin |
骨形态发生抑制蛋白SOST抗体 Anti-Sclerostin |
配子生成素结合蛋白1抗体 |
细胞角蛋白14抗体MAG-1; PLCH; 1 AGP acyltransferase 9; 1 acylglycerol 3 phosphate O acyltransferase 8; 1 acylglycerol 3 phosphate O acyltransferase 9; 1 AGPAT 9; Acyl CoA:glycerol 3 phosphate acyltransferase 3; AGPAT8; GPAT3; LPAAT theta; Lung cancer metastasis associated protein; Lysophosphatidic acid acyltransferase theta; MAG 1; MGC11324. |