一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005923 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005923 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005923 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:CLK3
中文名称:细胞分裂周期样激酶3抗体
别 名;CDC like kinase 3; CDC-like kinase 3; CLK3; CLK3_HUMAN; Dual specificity protein kinase CLK3.
研究领域;细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;73kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CLK3: 321-410/638
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Dual specificity kinase acting on both serine/threonine and tyrosine-containing substrates. Phosphorylates serine- and arginine-rich (SR) proteins of the spliceosomal complex. May be a constituent of a network of regulatory mechanisms that enable SR proteins to control RNA splicing and can cause redistribution of SR proteins from speckles to a diffuse nucleoplasmic distribution. Phosphorylates SRSF1 and SRSF3. Regulates the alternative splicing of tissue factor (F3) pre-mRNA in endothelial cells.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
SPELISAKit |
Notch转录调控蛋白RBPJK抗体 Anti-RBPJK/RBP-J |
白介素11受体α/IL-11Rα抗体 |
神经粘蛋白抗体 Anti-Neurocan |
IL-11RA |
G蛋白偶联诱导蛋白2受体抗体 |
1号染色体开放阅读框147抗体 |
TRIB1 |
噬菌体选择培养基I |
肿瘤抑制基因LPP2抗体 Anti-VANGL1/LPP2 |
C1orf147 |
线粒体核糖体蛋白S18A抗体 |
人钙离子通道抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒 |
MRPS18A |
鱼胰岛素样生长因子1(IGF-1)elisa分析检测试剂盒 |
嗅觉受体家族2亚基4抗体 Anti-OR2A4 |
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)elisa分析检测试剂盒 |
腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 Anti-PRKAA2/AMPK alpha 2 |
组蛋白去甲基化酶赖氨酸MINA抗体 |
核突触蛋白-α抗体(N端) Anti-alpha-Synuclein(NT) |
MINA53 |
睾丸特异蛋白抗体 Anti-TSBP |
双特异性磷酸酶抗体12抗体 |
豚鼠IgM(亲和纯化) |
DUSP12 |
Guinea pig IgM |
p53靶蛋白5抗体 Anti-TP53TG5 |
肿瘤异常甲基化蛋白2抗体 |
细胞分裂周期样激酶3抗体Ska1; SKA1_HUMAN; Spindle and kinetochore associated complex subunit 1; Spindle and kinetochore associated protein 1; Spindle and kinetochore-associated protein 1; Spindle and KT (kinetochore) associated 1; Spindle and KT associated 1; C18orf24; MGC10200. |