一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006616 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006616 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006616 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:CDC42
中文名称:细胞分化周期CDC42蛋白抗体
别 名;CDC 42; CDC42Hs; Cell division control protein 42 homolog; Cell division cycle 42; Cell division cycle 42 isoform 1; Cell division cycle 42 isoform 2; dJ224A6.1.1; dJ224A6.1.2; G25K; G25K GTP binding protein; Growth regulating protein; GTP binding protein 25kD; Small GTP binding protein CDC42; CDC42_HUMAN.
研究领域; 细胞周期蛋白 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;25kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CDC42: 101-191/191
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Plasma membrane-associated small GTPase which cycles between an active GTP-bound and an inactive GDP-bound state. In active state binds to a variety of effector proteins to regulate cellular responses. Involved in epithelial cell polarization processes. Regulates the bipolar attachment of spindle microtubules to kinetochores before chromosome congression in metaphase. Plays a role in the extension and maintenance of the formation of thin, actin-rich surface projections called filopodia. Mediates CDC42-dependent cell migration.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
HNEELISAKit |
RGAG4蛋白抗体 Anti-RGAG4 |
Hermansky-Pudlak综合征蛋白4抗体 |
神经细胞穿透素2抗体 Anti-NPTX2 |
HPS4 |
甲状旁腺(激)素及类似物抗体 |
肌动蛋白α3抗体 |
TIP39 |
叶绿体蛋白提取试剂盒100T |
信号通路WNT10A抗体 Anti-WNT10A |
ACTG2 |
Cullin 4a蛋白抗体 |
大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白细胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)elisa检测试剂盒免费代测 |
Cullin 4A |
人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)elisa分析检测试剂盒 |
多通道膜蛋白PTCHD2抗体 Anti-PTCHD2/DISP3 |
细胞GSK3激酶总活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
磷酸化亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 Anti-Phospho-PPIG (Ser376) |
MARCKS样蛋白1抗体 |
富含脯氨酸突触相关蛋白SHANK2抗体 Anti-SHANK2 |
MARCKSL1 |
β-taxilin蛋白抗体 Anti-TXLNB |
19号染色体开放阅读框24抗体 |
APC标记兔IgG(型对照) |
C19orf24 |
Rabbit IgG / APC |
感觉神经性耳聋常染色体隐性遗传61抗体 Anti-Slc26a5 |
转录起始因子RAP30抗体 |
细胞分化周期CDC42蛋白抗体hPanK3; MGC16863; OTTHUMP00000160961; Pank3; PANK3_HUMAN; Pantothenate kinase 3; pantothenic acid kinase; Pantothenic acid kinase 3. |