一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005389 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005389 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005389 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:CNOT4
中文名称:细胞表面趋化因子受体4相关蛋白4抗体
别 名;CCR4 NOT transcription complex subunit 4; CCR4-associated factor 4; CCR4-NOT transcription complex subunit 4; CLONE243; CNOT 4; Cnot4; CNOT4_HUMAN; E3 ubiquitin-protein ligase CNOT4; NOT 4; NOT4 (negative regulator of transcription 4 yeast) homolog; NOT4; NOT4H; Potential transcriptional repressor NOT4Hp.
研究领域;细胞生物 通道蛋白 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, )
产品应用;IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;64kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CNOT4: 21-120/575
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Has E3 ubiquitin ligase activity. The CCR4-NOT complex functions as general transcription regulation complex.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Qa-2ELISAKit |
环指蛋白14抗体 Anti-RNF14 |
甲状腺素(T4)elisa分析检测试剂盒 |
神经肽S抗体 Anti-NPS/Neuropeptide S |
T4 ELISA Kit |
精子相关抗原6抗体 |
人白介素33(IL-33)elisa分析检测试剂盒 |
SPAG6 |
大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)elisa检测试剂盒 |
锌指蛋白772抗体 Anti-ZNF772 |
IL-33ELISAKit |
去甲基化酶MBD2抗体 |
纯化线粒体磷氧比(ADP/O)定量检测试剂盒 |
MBD2 |
通用型猪沙门氏菌(Swine Salmonella)基因检测试剂盒 |
蛋白酶调解因子7抗体 Anti-PSMD7 |
TRAP染色试剂盒30T |
过氧化还原酶3抗体 Anti-PRDX3/peroxiredoxin 3 |
Lon蛋白酶2抗体 |
5-羟色胺受体7抗体 Anti-5HT7 Receptor/SR-7 |
LONP2 |
转移生长因子β3抗体(TGFβ3) Anti-TGF beta 3 propeptide |
细胞色素B5结构域蛋白1抗体 |
PE标记人IgG |
CYB5D1 |
Human IgG / PE |
SPG48蛋白抗体 Anti-SPG48 |
G蛋白偶联受体81抗体 |
细胞表面趋化因子受体4相关蛋白4抗体Androgen receptor N terminal interacting protein; Androgen receptor N-terminal-interacting protein; ARNIP; CH-rich-interacting match with PLAG1; CHIMP; E3 ubiquitin-protein ligase Pirh2; hARNIP; hPirh2; p53 induced protein with a RING H2 domain; p53-induced RING-H2 protein; PIRH2E; PIRH2F; PRO1996; RCHY1; Ring finger and CHY zinc finger domain containing 1 E3 ubiquitin protein ligase; RING finger and CHY zinc finger domain-containing protein 1; RING finger protein 199; RNF199; ZFP 363; Zinc finger protein 363; ZN363_HUMAN. |