一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009053 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009053 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009053 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:GPI
中文名称:糖磷脂酰肌醇抗体
别 名;Glucose 6 phosphate isomerase; AMF; Aurocrine motility factor; Autocrine motility factor; DKFZp686C13233; EC 5.3.1.9; G6PI_HUMAN; Glucose phosphate isomerase; Glucose-6-phosphate isomerase; GNPI; GPI; Gpi1; Hexose monophosphate isomerase; Hexosephosphate isomerase; Neuroleukin; NLK; Oxoisomerase; PHI; Phosphoglucose isomerase; Phosphohexomutase; Phosphohexose isomerase; Phosphosaccharomutase; SA 36; SA-36; SA36; Sperm antigen 36.
研究领域; 细胞生物 神经生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;63kDa
细胞定位;细胞核 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Glucose 6 phosphate isomerase: 401-500/558
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Besides it's role as a glycolytic enzyme, mammalian GPI can function as a tumor-secreted cytokine and an angiogenic factor (AMF) that stimulates endothelial cell motility. GPI is also a neurotrophic factor (Neuroleukin) for spinal and sensory neurons.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
甘氨酸含量测试盒 |
G蛋白偶联受体GPR176蛋白抗体 GPR176 |
大鼠抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)elisa检测试剂盒 |
脑特异性源蛋白BSX抗体 BSX |
植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒50T |
AF680标记的TWIST蛋白抗体 TWIST/AF680 |
人谷氨酸脱羧酶(GAD)elisa分析检测试剂盒 |
AF750标记的基质金属蛋白酶13抗体 MMP13, Alexa Fluor 750 conjugated |
通用腺病毒骨架载体(pAdEasy-1) |
尿路上皮特异蛋白1a抗体 Uroplakin Ia |
pBADCE4.1+目的基因 |
结蛋白单克隆抗体 Desmin |
人甘氨酸elisa检测试剂盒 |
巨核细胞白血病2抗体 MKL2 |
长春质碱含量测试盒 |
TMTC1蛋白抗体 TMTC1 |
大鼠糖蛋白130(gp130)elisa检测试剂盒免费代测 |
透明质酸合成酶2抗体 HAS2 |
异戊酰辅酶A脱氢酶抗体 IVD |
Skuld蛋白抗体 Skuld |
原癌基因蛋白/活化蛋白1重组兔单克隆抗体 c-Jun |
味觉受体蛋白1抗体 TRCG1 |
泛素激活酶2/泛素激活酶E1相关蛋白抗体 UBE1L / UBE2 |
细胞C-KIT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
肺癌转移相关蛋白1抗体 MED19/LCMR1 |
人β1,4-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(B4GALNT2)elisa检测试剂盒 |
G蛋白β2抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基2抗体 GNB2 |
大鼠白介素23(IL-23)elisa检测试剂盒 |
糖磷脂酰肌醇抗体2AAB_HUMAN; beta isoform of regulatory subunit A, protein phosphatase 2; PP2A A beta; PP2A subunit A isoform PR65-beta; PP2A subunit A isoform R1-beta; PP2A, subunit A, PR65 beta isoform; PP2A, subunit A, R1 beta isoform; PPP2R1B; PR65B; protein phosphatase 2 (formerly 2A), regulatory subunit A (PR 65), beta isoform; protein phosphatase 2 (formerly 2A), regulatory subunit A, beta isoform; Protein phosphatase 2 regulatory subunit A alpha isoform; protein phosphatase 2, structural/regulatory subunit A, beta isoform; Serine threonine protein phosphatase 65 kDa; serine/threonine protein phosphatase 2A 65 kDa regulatory subunit A, beta isoform; serine/threonine protein phosphatase 2A, 65 kDa regulatory subunit A, beta isoform; Serine/threonine-protein phosphatase 2A 65 kDa regulatory subunit A beta isoform. |