一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010833 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010833 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010833 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:MLF1/MLF2
中文名称:髓细胞性白血病蛋白1抗体
别 名;Hls7; MLF1; MLF2; MLF3; MLF1_HUMAN; Myelodysplasia myeloid leukemia factor 1; Myelodysplasia-myeloid leukemia factor 1; Myeloid leukemia factor 1; myeloid leukemia factor 1 variant 1; myeloid leukemia factor 1 variant 2; myeloid leukemia factor 1 variant 3.
研究领域; 心血管 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 干细胞 细胞周期蛋白 细胞分化 细胞类型标志物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Pig, Cow, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;31kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human MLF1/2/3: 165-268/268
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Involved in lineage commitment of primary hemopoietic progenitors by restricting erythroid formation and enhancing myeloid formation. Interferes with erythropoietin-induced erythroid terminal differentiation by preventing cells from exiting the cell cycle through suppression of CDKN1B/p27Kip1 levels. Suppresses RFWD2/COP1 activity via CSN3 which activates p53 and induces cell cycle arrest. Binds DNA and affects the expression of a number of genes so may function as a transcription factor in the nucleus.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
IL-9ELISAKIT |
Ras样蛋白A抗体 Anti-RALA |
鱼热休克蛋白40(HSP-40)elisa分析检测试剂盒 |
氯离子通道蛋白27抗体 Anti-NCC27/CLIC1 |
HSP-40 ELISA Kit |
T细胞识别的鳞状细胞癌SART3抗体 |
人肠道病毒71型(EV71)抗体(IgM)elisa分析检测试剂盒 |
SART3 |
细胞单胺氧化酶A型(MAO-A)活性荧光定量检测试剂盒 |
锌指蛋白231抗体 Anti-ZNF231 |
Humanenterovirus71virus(EV71)antibody(gM)ELISAkit |
唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体 |
牛白介素12(IL-12)elisa检测试剂盒 |
CLPTM1 |
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)elisa分析检测试剂盒 |
肠道71型/手足口病抗体 Anti-EV71 polyprotein VP1 |
丙酮酸脱羧酶(PDC)测试盒 |
NADPH氧化酶活化蛋白p47抗体 Anti-p47-phox |
Kelch样蛋白4抗体 |
源转录调节蛋白Sin3A抗体 Anti-mSin3A |
KLHL4 |
髓系细胞触发受体样转录因子2抗体 Anti-TREML2/TLT2 |
脑特异性血管**抑制蛋白1抗体 |
地抗血清 |
BAI1 |
Rabbit Anti-digoxin whole serum |
磷酸化认知缺陷突触相关蛋白SynGAP抗体 Anti-phospho-SynGAP (Ser836) |
锌指蛋白598抗体 |
髓细胞性白血病蛋白1抗体DKFZp781H1925; E2AK3_HUMAN; EC 2.7.11.1; EIF2AK3; Eukaryotic translation initiation factor 2 alpha kinase 3; Eukaryotic translation initiation factor 2-alpha kinase 3; Heme regulated EIF2 alpha kinase; HRI; HsPEK; Pancreatic eIF2 alpha kinase; Pancreatic eIF2-alpha kinase; PEK; PRKR like endoplasmic reticulum kinase; PRKR-like endoplasmic reticulum kinase; WRS. |