一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004178 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004178 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004178 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:Acid sphingomyelinase
中文名称:酸性神经鞘磷脂酶抗体
别 名;Acid sphingomyelinase; ASM; ASM_HUMAN; aSMase; NPD; Smpd1; Sphingomyelin phosphodiesterase 1 acid lysosomal; Sphingomyelin phosphodiesterase.
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Pig, Cow, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=2ug/Test ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;64kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Acid sphingomyelinase: 201-300/629
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Involvement in disease: Defects in SMPD1 are the cause of Niemann-Pick disease type A (NPDA) ; also known as Niemann-Pick disease classical infantile form. It is an early-onset lysosomal storage disorder caused by failure to hydrolyze sphingomyelin to ceramide. It results in the accumulation of sphingomyelin and other metabolically related
产品介绍:
Converts sphingomyelin to ceramide. Also has phospholipase C activities toward 1,2-diacylglycerolphosphocholine and 1,2-diacylglycerolphosphoglycerol. Isoform 2 and isoform 3 have lost catalytic activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MMP-2ELISAKit |
环指蛋白146抗体 Anti-RNF146 |
160kDa内含子结合蛋白抗体 |
硫酸软骨素蛋白多糖4/黑色素瘤相关蛋白抗体 Anti-NG2/CSPG4 |
IBP160 |
Src激活和信号分子蛋白抗体 |
脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体 |
TOM1L1 |
大鼠心肌营养素1(CT1)elisa检测试剂盒 |
等电压依赖性阴离子通道抗体 Anti-VDAC |
AFF2 |
D型天冬氨酸抗体 |
猪催产素(OT)elisa分析检测试剂盒 |
D.Aspartic acid |
乳品酪蛋白比色法定量检测试剂盒 |
骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子) Anti-OPGL/RANKL/ODF |
人甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)elisa分析检测试剂盒 |
Pan ras抗体 Anti-Pan-ras |
MAPK/ERK激酶3重组兔单克隆抗体 |
脂肪酸转运蛋白6抗体 Anti-SLC27A6/ACSVL2 |
MEKK3 |
胸腺基质细胞**素-1抗体(人) Anti-TSLP (human) |
1号染色体开放阅读框123抗体 |
胶体金标记的正常小鼠IgG |
C1orf123 |
Mouse IgG / Gold |
T细胞受体α抗体 Anti-TCR alpha |
丙肝病毒核心抗原C区抗体 |
酸性神经鞘磷脂酶抗体IDH3GL; NEL like protein 1; Nel related protein 1; NEL-like protein 1; Nel-related protein 1; Nell1; NELL1_HUMAN; Neural epidermal growth factor like 1; NRP1; Protein kinase C binding protein NELL1; Protein kinase C-binding protein NELL1. |