一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011184 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011184 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011184 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:DUSP4
中文名称:丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体
别 名;Mitogen activated protein kinase phosphatase
2; Dual specificity phosphatase 4; Dual specificity protein phosphatase 4; Dual
specificity protein phosphatase hVH2; DUSP 4; HVH 2; HVH2; MAP kinase
phosphatase 2; Mitogen activated protein kinase phosphatase 2; MKP 2; MKP-2;
MKP2; Serine/threonine specific protein phosphatase; TYP; VH 2; VH1 homologous
phosphatase 2; VH2.
研究领域; 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1ug/Test
IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;44kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human MKP-2: 301-394/394
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Hollow spherical complex composed of 24 subunits with pseudooctahedral symmetry, has a tetramer as the basic unit.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
人抗精子抗体(AsAb)elisa检测试剂盒 |
多囊肾蛋白2抗体 Anti-Polycystin 2 |
LIN7B蛋白抗体 |
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体 Anti-phospho-PRKAA2(Ser173) |
LIN7B |
磷酸化核仁磷酸蛋白抗体 |
膀胱癌相关蛋白BLCAP抗体 |
Phospho-Nucleophosmin (Ser4) |
组织NADP依赖性甘油醛-3-磷酸脱氢酶(NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光谱法定量检测试剂盒 |
抗药蛋白抗体 Anti-SR1/Sorcin |
BLCAP |
转录下调蛋白1抗体 |
人Ⅱ型前胶原N端前肽(PⅡNP)elisa检测试剂盒 |
DR1 protein |
小鼠磷脂酶D2(PLD2)elisa检测试剂盒 |
神经降压素受体2抗体 Anti-NTR2/Neurotensin Receptor 2 |
大鼠Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)elisa检测试剂盒 |
胰岛细胞因子β抗体 Anti-REG1β/REG1 beta |
Noxa蛋白抗体 |
X射线修复交叉互补蛋白3抗体 Anti-XRCC3 |
Noxa |
PSD95结合蛋白1抗体 Anti-SAPAP1/DLGAP1 |
9号染色体开放阅读框171抗体 |
大鼠β1整合素(ITG β1)elisa分析检测试剂盒 |
C9orf171 |
ITG β1 ELISA Kit |
肿瘤蛋白D53抗体 Anti-TPD52L1/D53 |
人核糖核酸酶(RNASE1/RIB1/RNS1)elisa分析检测试剂盒 |
丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体C25H; Cholesterol 25 hydroxylase; Cholesterol 25-hydroxylase; Cholesterol 25 monooxygenase; EC 1.14.99.38; EC=1.14.99.38; h25OH; CH25H_HUMAN. |