一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011208 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011208 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011208 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:MEK7
中文名称:丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体
别 名;c-Jun N-terminal kinase kinase 2; Dual
specificity mitogen activated protein kinase kinase 7; Dual specificity mitogen-activated
protein kinase kinase 7; JNK activating kinase 2; JNK kinase 2; JNK-activating
kinase 2; Jnkk 2; Jnkk-2; Jnkk2; MAP kinase kinase 7; MAP2K7; MAPK/ERK kinase
7; MAPKK 7; MAPKK-7; MAPKK7; MEK 7; Mitogen Activated Protein Kinase kinase 7; MKK
7; MKK-7; MKK7; MP2K7_HUMAN; PRKMK 7; PRKMK-7; PRKMK7; Sek 2; Sek-2; Sek2.
研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;46kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human MKK7: 301-419/419
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Dual specificity protein kinase which acts as an essential component of the MAP kinase signal transduction pathway. Essential component of the stress-activated protein kinase/c-Jun N-terminal kinase (SAP/JNK) signaling pathway. With MAP2K4/MKK4, is the one of the only known kinase to directly activate the stress-activated protein kinase/c-Jun N-terminal kinases MAPK8/JNK1, MAPK9/JNK2 and MAPK10/JNK3. MAP2K4/MKK4 and MAP2K7/MKK7 both activate the JNKs by phosphorylation, but they differ in their preference for the phosphorylation site in the Thr-Pro-Tyr motif
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
sIL-2RαELISAkit |
Ras相关区域家族1A抗体 Anti-RASSF3 |
鱼磷酸烯醇丙酮酸羧激酶,线粒体(PCK2)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体 Anti-Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870) |
mitochondrial(PCK2)ELISA kit |
Src家族相关磷酸化蛋白2抗体 |
人补体因子B前体(pre-CFB)elisa分析检测试剂盒 |
SCAP2 |
组织C-MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
锌指蛋白300抗体 Anti-ZNF300 |
pre-CFBELISAKit |
LENG1蛋白抗体 |
人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶(PL7)elisa分析检测试剂盒 |
LENG1 |
小鼠生长分化因子15(GDF15)elisa检测试剂盒 |
蛋白质磷酸酶2A亚基3抗体 Anti-PPP2R3 |
大鼠β防御素(β-Defensin)elisa检测试剂盒 |
过氧化物酶体**蛋白5相关蛋白抗体 Anti-Peroxin 5R/PEX5-related protein |
E3泛素蛋白连接酶亚基KPC2抗体 |
S100P结合蛋白抗体 Anti-S100PBP/S100P binding protein |
KPC2 |
驱动蛋白结合蛋白1抗体 Anti-TRAK1 |
细胞连接相关蛋白2抗体 |
兔抗鸡IgG H&L抗血清 |
CLASP2 |
Rabbit Anti-Chicken IgG H&L whole serum |
分选连接蛋白5抗体 Anti-SNX5 |
γ-谷氨酰转肽酶5轻链抗体 |
丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体LIM kinase 1+2; LIMK1+LIMK2; LIM domain kinase 1; LIM domain kinase 2; LIMK1; LIMK2;LIMK1_HUMAN; LIMK2_HUMAN. |