一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012244 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012244 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012244 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:PCTAIRE2
中文名称:丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PCTK2抗体
别 名;PCTAIRE-2; PCTAIRE-motif protein kinase 2;
PCTK2; Protein kinase cdc2-related PCTAIRE-2; Serine/threonine-protein kinase
PCTAIRE-2; 6430598J10Rik; EC 2.7.1.37; MGC25109; CDK17_HUMAN.
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞周期蛋白 激酶和磷酸酶 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Sheep, (predicted: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog,
Cow, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;60kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human PCTAIRE2: 301-400/523
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
PCTAIREs are members of a subfamily of Cdc2-related kinases that are preferentially expressed in post-mitotic cells. PCTAIRE 2 is specifically expressed in the brain. Within the brain, PCTAIRE 2 is concentrated in the neuronal layers of the hippocampus and olfactory bulb, which mostly consist of post-mitotic neurons. In an immunocytochemical study, immunoreactivity for PCTAIRE 2 was detected in the cell bodies and extended neurites of neurons, but not in astrocytes. The PCTAIRE 2 protein is recovered in the particulate fraction and is resistant to solubilization with non-ionic detergent, suggesting that PCTAIRE 2 might be present as a component of a large protein complex. An immunoprecipitation assay revealed that the PCTAIRE 2 is associated with Ser/Thr-phosphorylating activity for histone H1, and that its activity depends on association with a regulatory partner that can be released under high-salt conditions. These findings suggest that PCTAIRE 2 is a Ser/Thr kinase that might play a unique role in terminally differentiated neurons.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠葡萄糖激酶(GK)elisa检测试剂盒 |
ELAVL1抗体 ELAVL1 |
大鼠白介素5(IL-5)elisa检测试剂盒 |
磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体 phospho-CSK (Ser364) |
小鼠凝血因子Ⅷ(F8)elisa检测试剂盒 |
组蛋白H3K9甲基转移酶4抗体 SETDB1/KMT1E |
人CD19分子(CD19)elisa分析检测试剂盒 |
12号染色体开放阅读框24抗体 C12ORF24 |
通用型密执岁棍状杆菌棋盘亚种Clavibacter michiganensis subsp. Tessellarius;CMT)基因检测试剂盒 |
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2重组兔单克隆抗体 Phospho-MEK1/2 (Ser218 + Ser222) |
细胞基质金属(MMP-2)琥珀酰明胶法比色定量检测试剂盒 |
黑色素瘤硫酸软骨素蛋白多糖4抗体 NG2 |
土壤羟胺还原酶(HR)测试盒 |
环指蛋白156抗体 RNF156 |
人体血小板粗提分离试剂盒 |
PerCP-Cy5.5标记人HLA-DR单克隆抗体 human HLA-DR/PerCP-Cy5.5 |
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神经细胞特异性转录因子LDB1抗体 LDB1 |
锌指蛋白537抗体 ZNF537 |
PDLIM2蛋白抗体 PDLIM2 |
锌指蛋白835抗体 ZNF835 |
双甲基精氨酸水解酶2抗体 DDAH2 |
层粘连蛋白B2γ1抗体 Laminin B2 gamma 1 |
冰冻切片制片预处理脱水液 |
次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1单克隆抗体 HPRT1 |
碱性木聚糖酶测定试剂盒 |
DPM1蛋白抗体 DPM1 |
动物牙齿DNA萃取试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PCTK2抗体Acetate kinase 1; Acetokinase 1; Activated CDC42 kinase 1; Activated Cdc42 associated kinase 1; Activated p21cdc42Hs kinase; Tyrosine kinase non receptor 2; Tyrosine kinase non-receptor protein 2; non-receptor protein tyrosine kinase ACK; ACK; TNK 2; Tnk2; ACK1; FLJ44758; FLJ45547; ACK 1; ACK-1; ACK1_HUMAN; Activated p21cdc42Hs kinase; FLJ44758; FLJ45547; Tyrosine kinase non receptor protein 2; p21cdc42Hs. |