一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ014899 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ014899 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ014899 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Staufen
中文名称:双链RNA结合蛋白Staufen抗体
别 名;Double stranded RNA binding protein Staufen
homolog 1; Double stranded RNA binding protein Staufen homolog; Double-stranded
RNA-binding protein Staufen homolog 1; Double-stranded RNA-binding protein
Staufen homolog; FLJ25010; MGC124588; STAU; STAU1; STAU1_HUMAN; staufen;
Staufen RNA binding protein (Drosophila); Staufen RNA binding protein homolog
1.
神经生物学 细胞骨架 细胞外基质
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Cow, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;63, 126kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Staufen/STAU1: 421-520/577
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Binds double-stranded RNA (regardless of the sequence) and tubulin. May play a role in specific positioning of mRNAs at given sites in the cell by cross-linking cytoskeletal and RNA components, and in stimulating their translation at the site.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
INSULIN R-ALPHA 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体 Anti-PAK6 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白14抗体 |
磷酸化Nemo样激酶抗体 Anti-Phospho-Nemo-like kinase (Thr298) |
KCTD14 |
雌受体α抗体 |
肽/天蚕肽抗体 |
Estro receptor alpha |
小鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)elisa检测试剂盒 |
视黄酸激活基因8抗体 Anti-Stra8 |
Cecropin-A |
肉豆蔻酰基转移酶2-N端肽抗体 |
细胞色素P450亚酶CYP1A2(MROD)活性荧光定量检测试剂盒 |
NMT2 |
大鼠胃动素受体(MTLR)elisa检测试剂盒 |
肿瘤抑制基因抗体 Anti-Nm23-H2 |
植物环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒 |
癌基因RAS相关蛋白Rab25抗体 Anti-Rab25 |
NAALADL2蛋白抗体 |
SLAMF7抗体 Anti-SLAMF7/CD319/CS1 |
NAALADL2 |
破伤风重链抗体 Anti-Tetanus Toxin heavy chain |
肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体 |
大鼠催产素(OT)elisa分析检测试剂盒 |
FKBP11 |
OT ELISA Kit |
端粒酶调节相关蛋白抗体 Anti-TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase |
人结蛋白(DES)抗体elisa分析检测试剂盒 |
双链RNA结合蛋白Staufen抗体NAD dependent deacetylase sirtuin 5; NAD-dependent deacetylase sirtuin 5; NAD-dependent deacetylase sirtuin-5; Silent mating type information regulation 2 S.cerevisiae homolog 5; Sir2 like 5; Sir2-like 5; SIR2-like protein 5; SIR2L5; Sirt5; SIRT5_HUMAN; Sirtuin type 5. |