一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008144 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008144 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008144 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Fibulin 5
中文名称:衰老关键蛋白抗体
别 名;ARMD3; Dance; Developmental arteries and
neural crest EGF like protein; FBLN5; FIBL 5; Developmental arteries and neural
crest EGF-like protein; EVEC; Fbln5; FBLN5_HUMAN; UP50; FIBL 5; FIBL-5; Fibulin-5;
FLJ90059; Urine p50 protein.
研究领域;心血管 学 信号转导 病 细胞骨架 细胞外基质
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;48kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Fibulin 5: 345-448/448
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Promotes adhesion of endothelial cells through interaction of integrins and the RGD motif. Could be a vascular ligand for integrin receptors and may play a role in vascular development and remodeling.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
IL-22ELISAKit |
复制因子A蛋白2 Anti-RPA32/RPA2 |
鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化IKB alpha抗体 Anti-phospho-NFKBIA(Tyr305) |
hs-CRP ELISA Kit |
SCN1A抗体 |
人补体片段3d(C3d)elisa分析检测试剂盒 |
SCN1A |
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)elisa检测试剂盒 |
锌指蛋白370抗体 Anti-ZDHHC7/ZNF370 |
C3dELISAKit |
胶原蛋白4a2亚基抗体 |
小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)elisa检测试剂盒 |
CO4A2 |
组织FGR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
脯氨酸脱氢酶抗体 Anti-PRODH |
人sCD80elisa检测试剂盒 |
抑癌蛋白DLP1 Anti-PDSS2 |
KRI1蛋白抗体 |
导向蛋白3B抗体 Anti-Semaphorin 3B |
KRI1 |
前列腺癌和结肠癌相关蛋白 Anti-TPD52/Prostate and colon associated protein |
巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体 |
驴抗兔IgG H&L |
BBS6 |
Donkey Anti-Rabbit IgG H&L |
发育多能性相关蛋白3抗体 Anti-Stella/DPPA3 |
锌指蛋白689抗体 |
衰老关键蛋白抗体ESTM 46; FLJ 21841; FLJ21841; Intermediate filament protein; Nbla00170; Nes; NEST_HUMAN; Nestin. |