一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013052 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013052 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013052 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:RAMP2
中文名称:受体活性修饰蛋白2抗体
别 名;Calcitonin receptor like receptor activity
modifying protein 2; CRLR activity modifying protein 2; OTTMUSP00000002615;
OTTMUSP00000037624; Receptor (calcitonin) activity modifying protein 2;
Receptor activity modifying protein 2; Receptor activity modifying protein 2
isoform; RP23-281C18.6; RAMP2_HUMAN.
研究领域; 细胞生物 信号转导 生长因子和 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 细胞膜蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;15kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human RAMP2: 81-175/175 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
RAMP2 (Receptor activity-modifying protein 2) transports the calcitonin gene-related peptide type 1 receptor (CALCRL) to the plasma membrane. RAMP2 acts as a receptor for adrenomedullin (AM) together with CALCRL. Co-expression of Receptor activity-modifying protein 2 (RAMP2) with the calcitonin-receptor-like-receptor (CRLR) results in the production of a functional adrenomedullin (ADM) receptor. RAMPs regulate the transport and ligand specificity of the calcitonin-receptor-like receptor. RAMP2 is a heterodimer of CALCRL and RAMP2. RAMP2 is strongly expressed in lung, breast, immune system and fetal tissues. RAMP2 belongs to the RAMP family.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
IL-1raELISAkit |
磷酸化细胞迁移诱导因子5抗体 Anti-phospho-RAC1(Ser71) |
鱼金属硫蛋白(MT)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化1型神经纤维瘤抗体 Anti-phospho-NF1(Ser2515) |
MT ELISA kit |
电压门控钠离子通道型α4抗体 |
人补体蛋白5(C5)elisa分析检测试剂盒 |
SCN4A |
Wnt蛋白家族7B抗体 Anti-WNT7B |
锌指蛋白239抗体 Anti-ZNF239 |
C5ELISAKit |
胶原样蛋白抗体 |
轴突生长诱向因子G2抗体 Anti-Netrin G1/G2 |
COL20A1 |
RAS相关蛋白癌基因Rab35抗体 Anti-RAB35 |
前动力蛋白2抗体 Anti-PROK2/Prokineticin 2 |
碳酸氢钠协转运蛋白4-A4抗体 Anti-SLC4A4 |
血小板源性生长因子AA+BB抗体 Anti-PDGFAA + PDGFBB |
毛发角蛋白37抗体 |
钠通道蛋白10α抗体 Anti-SCN10A/NAV1.8 |
KRT37/KRT38 |
磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 Anti-Phospho-TIF1 beta(Ser824) |
Bcl2样凋亡蛋白9抗体 |
羊抗豚鼠IgG H&L |
Bcl 2 like protein 9 |
Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L |
亚硫酸盐氧化酶抗体 Anti-Sulfite oxidase/SUOX |
锌指蛋白690抗体 |
受体活性修饰蛋白2抗体FLJ23741; Fork head related protein like B; Forkhead box P1; Forkhead box protein P1; 12CC4; foxp1; FOXP1_MOUSE; FOX P1; FOXP 1; Glutamine rich factor 1; hFKH1B; HSPC215; MGC12942; MGC88572; MGC99551; QRF 1; QRF1. |