一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006709 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006709 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006709 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:I-309/CCL1
中文名称:嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗体
别 名;C-C motif chemokine 1 precursor; chemokine
(C-C motif) ligand 1; BF534335; I-309; Scya1; CCL1; Chemokine CC Motif Ligand
1; inflammatory cytokine I-309; P500; SCYA1; SISe; small inducible cytokine A1;
T lymphocyte secreted protein I-309; TCA3.
研究领域;细胞生物 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human,
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;10kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human I-309/CCL1: 51-96/96
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Cytokine that is chemotactic for monocytes but not for neutrophils. Binds to CCR8.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
CD39样蛋白2/ENTPD6抗体 ENTPD7 |
活性氧检测试剂盒DCFHDA200T |
离子型谷氨酸受体1重组兔单克隆抗体 NMDAR1 |
大鼠球蛋白E(IgE)elisa检测试剂盒 |
肿瘤坏死因子受体相关因子7抗体 TRAF7 |
酵母5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性 |
轴突蛋白2抗体 NRXN2 |
锌指蛋白ZBTB34抗体 Anti-ZBTB34 |
磷酸化CREB-1抗体 phospho-CREB-1 (Ser133) |
土壤β-葡萄糖苷酶(β - GC)测试盒 |
睾丸特异激酶底物蛋白抗体 TSKS |
细胞核因子/k基因结合核因子 p52/p100抗体 Anti-NFKB p52 |
骨形态发生蛋白3抗体 BMP3 |
受体相互作用蛋白激酶1抗体 Anti-RIP1/RalBP1 |
MS4A18蛋白抗体 MS4A18 |
钙结合线粒体载体蛋白抗体 Anti-SLC25A12/ARALAR |
人瘤病毒16型L2抗体 HPV16 L2 |
纤维母细胞生长因子3抗体 FGF3 |
L-丝氨酸脱氨酶抗体 SDSL |
线粒体内膜转位源蛋白9抗体 TIMM9 |
/通透性增加蛋白样3抗体 BPIL3 |
γ干扰素诱导蛋白16抗体 IFI16 |
人别孕烯醇酮/3α,5α-四氢孕酮(AP/3α,5α-THP)elisa检测试剂盒 |
白介素17受体D抗体 IL-17RD |
组织样品组织D(CATHEPSIN D)活性荧光定量检测试剂盒 |
BRD2蛋白重组兔单克隆抗体 BRD2 |
小鼠轮状病毒(RV)抗原(Ag)elisa检测试剂盒 |
嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗体BF 1; BF 2; BF-1; BF-2; BF1; BF2 ; Brain factor 1; Brain factor 2; FHKL; FKH2; FKHL1; FKHL2; FKHL2; FKHL3; FKHL4; Forkhead box G1A; Forkhead box G1B; Forkhead box protein G1; Forkhead box protein G1A; Forkhead box protein G1B; Forkhead box protein G1C; Forkhead drosophila homolog like 2; Forkhead like 1; Forkhead like 2; FOXG1_HUMAN. |