一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007454 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007454 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007454 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:ECRG4
中文名称:食道癌相关基因4蛋白抗体
别 名;AUGN_HUMAN; Augurin; C2orf40; Esophageal
cancer-related gene 4 protein.
研究领域; 细胞生物 神经生物学 生长因子和
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Rat, (predicted: Human, Mouse, Dog, Pig, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 IEM=1:20-200
ICA=1:20-200 ChIP=1:20-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;7.8kDa
细胞定位;细胞浆 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human ECRG4/C2orf40: 41-148/148
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Probable hormone that may induce senescence of oligodendrocyte and neural precursor cells, characterized by G1 arrest, RB1 dephosphorylation and accelerated CCND1 and CCND3 proteasomal degradation.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
NT-3ELISAkit |
植物种子叶绿体粗提分离试剂盒 |
大鼠丙氨酸氨基转移酶(ALT)elisa分析检测试剂盒 |
可溶性酸性转化酶(S-AI)测试盒 |
ALT ELISA Kit |
NDUFAF7蛋白抗体 |
人激肽释放酶1(KLK 1)elisa分析检测试剂盒 |
NDUFAF7 |
动物源性食品羊源基因检测试剂盒 |
大鼠糖原合酶激酶3β(GSK3β)elisa检测试剂盒 |
KLK1ELISAKit |
6号染色体开放阅读框186抗体 |
山羊肝脂酶(HL)elisa检测试剂盒 |
C6orf186 |
CCK-8(水溶性四氮唑-8) 比色法细胞繁殖测定试剂盒 |
p21活化蛋白激酶ARHG7抗体 Anti-PAK3/ARHG7 |
大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)elisa分析检测试剂盒 |
KLHDC9蛋白抗体 Anti-KLHDC9 |
鱼生长(GH)elisa分析检测试剂盒 |
味觉感受器蛋白T2R38抗体 Anti-T2R38/TAS2R38 |
GH ELISA Kit |
转绿调节因子SLTM抗体 Anti-SLTM |
人巢蛋白1(NID1)elisa分析检测试剂盒 |
PE-Cy7标记的兔抗人IgG H&L |
NID1ELISAKit |
Rabbit Anti-Human IgG H&L / PE-Cy7 |
人肝X受体β(LXRβ)elisa检测试剂盒 |
RSPH10B蛋白抗体 |
食道癌相关基因4蛋白抗体C4b-A; complement C4-A proprotein; Acidic complement C4; Basic complement C4; CH; Chido blood group; Complement component 4A; Complement component 4B; RG; Rodgers blood group; CO4A_HUMAN; CO4B_HUMAN; C4A; C4; C4A2; C4A3; C4A4; C4A6; C4AD; C4S; CO4; CPAMD2; RG. |