一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010268 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010268 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010268 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:KIBRA
中文名称:肾脏和脑蛋白抗体
别 名;HBeAg-binding protein 3; HBEBP36; KIAA0869;
KIBRA; Kidney and brain protein; Protein KIBRA; Protein WWC1; WW and C2 domain
containing 1; WW C2 and coiled-coil domain containing 1; WW domain-containing
protein 1; WWC1; KIBRA_HUMAN.
研究领域;神经生物学 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Cow, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;125kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human KIBRA: 351-450/1113
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
KIBRA is a WW domain containing protein, first identified by yeast 2-hybrid analysis of a human brain cDNA expression library. Gene expression studies have shown that KIBRA is expressed in memory-related brain structures including the hippocampus (dentate gyrus and the CA1 region) and the temporal lobe, 2 key regions for memory, and that the expression of specific KIBRA alleles is significantly associated with memory performance.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠白介素1α(IL-1α)elisa检测试剂盒 |
AF680标记的原纤维蛋白1抗体 Fibrillin 1, Alexa Fluor 680 conjugated |
高通量远红外细胞筛选技术试剂盒 |
胶原蛋白6α2抗体 Collagen VI alpha 2 |
小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)elisa检测试剂盒 |
抑制素A/Inhibin α抗体 Inhibin Alpha |
大鼠诱导型一氧化合成酶(iNOS)elisa检测试剂盒 |
原钙粘附蛋白α3抗体 PCDHA3 |
聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase;PMG)活性比色法定量检测试剂盒 |
精氨酸结合蛋白2抗体 SORBS2 |
细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
范可尼贫血相关蛋白E抗体 FANCE |
视黄醇结合蛋白RBP试剂盒 R1:45ml×1 R2:15ml×1 浊度法 |
弗林蛋白酶重组兔单克隆抗体 Furin |
小鼠抗心肌抗体(AMA)elisa检测试剂盒 |
G蛋白信号转导调节因子2抗体 RGS2 |
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa检测试剂盒 |
内皮脂肪酶抗体 Endothelial lipase |
外周髓鞘蛋白-22重组兔单克隆抗体 PMP22 |
G蛋白偶联受体125抗体 GPR125 |
无毛发蛋白抗体 Hairless |
起始识别复合蛋白亚基1抗体 ORC1L/ORC1 |
SERTAD4蛋白抗体 SERTAD4 |
陈旧血红细胞溶解液 |
SUSD5蛋白抗体 SUSD5 |
大鼠前列腺素F(PGF)elisa检测试剂盒免费代测 |
AF488标记的程序性死亡配体1(CD274)抗体 PD-L1, Alexa Fluor 488 conjugated |
低盐LB培养液 |
肾脏和脑蛋白抗体PK 1; PK 2; PK 3; PK Muscle type; PK1; PK2; Pk3; PKL; PKLR; PKM 2; PKM; PYKM; Pyruvate kinase 1; Pyruvate kinase 2/3; Pyruvate kinase 3; Pyruvate kinase isozyme R/L; Pyruvate kinase isozymes M1/M2; Pyruvate kinase liver and blood cell; Pyruvate kinase liver and RBC; Pyruvate kinase liver and RBC type; Pyruvate kinase M2; Pyruvate kinase muscle; Pyruvate kinase muscle isozyme; Pyruvate kinase type L; R type/L type pyruvate kinase; Red cell/liver pyruvate kinase; RPK; TCB; THBP 1; THBP1; Thyroid hormone binding protein cytosolic; CTHBP; Cytosolic thyroid hormone binding protein; MGC3932; OIP 3; Oip3; Tumor M2-PK; p58; OIP-3; KPYM_HUMAN. |