一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013093 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013093 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013093 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:RENBP
中文名称:肾素结合蛋白抗体
别 名;AGE; EC 5.1.3.8; GlcNAc 2 epimerase; GlcNAc
2-epimerase; N acetyl D glucosamine 2 epimerase; N-acetyl-D-glucosamine
2-epimerase; N-acylglucosamine 2-epimerase; RBP; RENBP; RENBP_HUMAN; Renin
binding protein; Renin-binding protein; RNBP.
研究领域; 细胞生物 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;49kDa
细胞定位;细胞浆 细胞外基质 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human RENBP: 101-200/427
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Catalyzes the interconversion of N-acetylglucosamine to N-acetylmannosamine. Binds to renin forming a protein complex called high molecular weight (HMW) renin and inhibits rennin activity. Involved in the N-glycolylneuraminic acid (Neu5Gc) degradation pathway: although human is not able to catalyze formation of Neu5Gc due to the inactive CMAHP enzyme, Neu5Gc is present in food and must be degraded.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
豚鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)elisa分析检测试剂盒 |
AF680标记的环指蛋白15抗体 RNF15, Alexa Flour 680 conjugated |
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减数分裂特异核结构蛋白1抗体 MNS1 |
组织PKCη激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
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小鼠神经调节蛋白2(NRG2)elisa检测试剂盒 |
原癌基因wnt7a蛋白抗体 WNT7A |
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豚鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)elisa检测试剂盒 |
G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体 GPR158 |
LAMBDA噬菌体DNA树脂纯化试剂盒 |
脑特异性磷脂酸磷酸酶样蛋白1抗体 LPPR4 |
脱碘酶2抗体 DIO2 |
G蛋白α抑制蛋白2抗体 G protein alpha Inhibitor 2 |
维甲酸受体β抗体 RARB |
盘状结构域受体蛋白2抗体 CD167b/DDR2 |
SARM蛋白抗体 SARM1 |
大鼠白介素33(IL33)elisa检测试剂盒 |
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小鼠黄嘌呤脱氢酶(XDH)elisa检测试剂盒 |
Ⅱ型胶原α1 N端前体肽抗体 procollagen type IIA |
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)elisa分析检测试剂盒 |
肾素结合蛋白抗体80 kDa protein; 80K L; 80K L protein; 80K-L protein; 80KL; 81 kDa protein, light chain; light chain; MACS; MARCKS; MARCS; MARCS_HUMAN; MGC52672; myristoylated alanine rich C kinase substrate; Myristoylated alanine rich protein kinase C substrate (MARCKS, 80K L); Myristoylated alanine rich protein kinase C substrate; Myristoylated alanine-rich C-kinase substrate; Phosphomyristin; PKCSL; PRKCSL; protein kinase C substrate 80 kDa protein light chain; Protein kinase C substrate. |