一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008671 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008671 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008671 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GPM6B
中文名称:神经细胞膜糖蛋白M6b
别 名;M6b; Neuronal membrane glycoprotein M6b;
rhombex 29; GPM6B_HUMAN.
研究领域;细胞生物 发育生物学 神经生物学 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Pig, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other
applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;29kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GPM6B: 1-100/265
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
May be involved in neural development. Involved in regulation of osteoblast function and bone formation. Involved in matrix vesicle release by osteoblasts; this function seems to involve maintenance of the actin cytoskeleton. May be involved in cellular trafficking of SERT and thereby in regulation of serotonin uptake.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)elisa分析检测试剂盒 |
20号染色体开放阅读框26抗体 C20orf26 |
人B7-H4 elisa分析检测试剂盒 |
磺基转移酶抗体1C2抗体 SULT1C2 |
20%中性Formalin固着液 |
嗅觉受体52E1抗体 OR52E1 |
小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa分析检测试剂盒 |
血红素抗体 Hemoglobin |
水苏糖含量测试盒 |
肌球蛋白重链9抗体 MYH9 |
大鼠层粘蛋白α1(LAMA1)elisa检测试剂盒 |
蛋白激酶C mu型抗体 PRKD1/PKC mu |
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/裂解样品制备试剂盒 |
蛋白质磷酸酶2A亚基3抗体 PPP2R3 |
咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
FITC标记人/小鼠ZAP-70单克隆抗体 human/mouse ZAP-70/FITC |
小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体 Phospho-p57 Kip2 (Thr310) |
丝氨酸蛋白酶37抗体 Protease serine 37 |
FAM58A蛋白抗体 FAM58A |
髓磷酯髓鞘蛋白1单克隆抗体 PLP1 |
卵母细胞TRO抗体 Magphinin |
PE标记人CD4单克隆抗体 Human CD4-PE |
汞离子检测试剂盒 |
PSF2蛋白抗体 PSF2 |
小鼠白介素7(IL-7)elisa检测试剂盒 |
19号染色体开放阅读框44抗体 C19orf44 |
N-乙酰神经氨酸醛缩酶 EC4.1.3.3 1KU/瓶 |
神经细胞膜糖蛋白M6bActin binding protein scraps homolog Drosophila; Actin binding protein anillin; Anillin actin binding protein; ANLN; DKFZp779A055; Scra; Scraps; Scraps homolog. |