一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012206 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012206 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012206 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Plexin A4
中文名称:神经丛蛋白A4抗体
别 名;FAYV2820; KIAA1550; PLEXA4; Plexin-A4;
PlexinA4; PLXA4_HUMAN; PLXNA4; PLXNA4A; PLXNA4B; PRO34003; UNQ2820/PRO34003.
研究领域;发育生物学 神经生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;210kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Plexin A4: 401-500/1894 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Coreceptor for SEMA3A. Necessary for signaling by class 3 semaphorins and subsequent remodeling of the cytoskeleton. Plays a role in axon guidance in the developing nervous system. Class 3 semaphorins bind to a complex composed of a neuropilin and a plexin. The plexin modulates the affinity of the complex for specific semaphorins, and its cytoplasmic domain is required for the activation of down-stream signaling events in the cytoplasm
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
人单胺氧化酶(MAO)elisa分析检测试剂盒 |
组氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗体 HPRG |
鸡α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)elisa检测试剂盒免费代测 |
核孔复合体蛋白抗体 NUP107 |
石蜡切片组织化学HRP酶联DAB完全间接检测试剂盒 |
锌指蛋白346抗体 ZNF346 |
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)elisa分析检测试剂盒 |
锌指蛋白72抗体 ZFP72 |
甘油含量测试盒测定组织样本 100T 微量酶标法 |
核有丝分裂器NuMA蛋白抗体 NUMA1 |
大鼠I型胶原(COL1)elisa检测试剂盒 |
补体C1qα链多肽重组兔单克隆抗体 C1QA |
动物细胞/组织线粒体超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分离试剂盒 |
成熟T细胞增殖蛋白1抗体 CMC4 |
咖啡乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
ECT2L蛋白抗体 ECT2L |
小鼠百白破抗体elisa检测试剂盒 |
磷酸化红细胞膜条带4.1蛋白抗体 phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660) |
神经营养因子受体相互作用因子1抗体 Nrif1 |
DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗体 POLG |
食道癌相关基因抗体 SPINK7 |
磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(P-p38 MAPK) Phospho-P38 MAPK (Thr180 + Tyr182) |
NSUN5P2蛋白抗体 NSUN5P2 |
蛋白质转印印迹膜萘酚蓝黑(NBB)染色试剂盒 |
Pacific Blue标记小鼠CD11b单克隆抗体 mouse CD11b/Pacific Blue |
小鼠CC趋化因子受体6(CCR-6)elisa分析检测试剂盒 |
转录因子SOX5抗体 SOX5 |
大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)elisa检测试剂盒 |
神经丛蛋白A4抗体B220; CD 45; CD45; cd45 antigen; ec3.1.3.48; CD45R; GP180; GP180; GP 180; L CA; LCA; L-CA; Leukocyte common antigen; LY5; Protein tyrosine phosphatase receptor type C; Protein tyrosine phosphatase receptor type c polypeptide; protein tyrosine phosphatase, receptor type, C; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C; PTPRC; PTPRC_HUMAN; SCID due to PTPRC deficiency; T200; T200 glycoprotein; T200 leukocyte common antigen; Human homolog of severe combined immunodeficiency due to PTPRC deficiency. |