一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006897 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006897 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006897 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:DDX3
中文名称:三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体
别 名;ATP dependent RNA helicase DDX3X;
ATP-dependent RNA helicase DDX3X; CAP Rf; DBX; DDX14; DDX3X; DDX3X_HUMAN; DEAD
(Asp Glu Ala Asp) box polypeptide 3 X linked; DEAD box; DEAD box protein 3;
DEAD box protein 3 X-chromosomal; DEAD box X isoform; DEAD/H (Asp Glu Ala
Asp/His) box polypeptide 3; DEAD/H box 3; Fibroblast Growth Factor Inducible
14; Fin14; Helicase like protein 2; Helicase-like protein 2; HLP2; X isoform;
X-chromosomal.
研究领域;细胞生物 发育生物学 干细胞 细胞周期蛋白 病毒 转运蛋白 细胞表面分子 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Pig, Horse, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:400-800 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;73kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human DDX3: 1-100/662
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
ATP-dependent RNA helicase. Acts as a cofactor for XPO1-mediated nuclear export of incompletely spliced HIV-1 Rev RNAs. Also involved in HIV-1 replication. Interacts specifically with hepatitis C virus core protein resulting in a change in intracellular location.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
隐孢子虫(Cryptosporidium)涂片金洋抗酸(Kinyoung Acid Fast)染色试剂盒 |
配对盒基因2抗体 Anti-PAX2 |
甲基化CpG结合蛋白3抗体 |
过氧化还原酶1抗体 Anti-PRDX1 |
MBD3 |
PE-Cy7标记的兔抗狗IgG H&L |
19号染色体开放阅读框42抗体 |
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / PE-Cy7 |
细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性酶动力比色法 |
调控周期蛋白依赖蛋白激酶SEI2抗体 Anti-SERTAD2 |
C19orf42 |
延伸因子结合蛋白EFTUD2抗体 |
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸转移酶(PFP)测试盒 |
EFTUD2 |
小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgG(GAD-Ab-IgG)elisa检测试剂盒 |
雄受体复合物相关蛋白/核受体相互作用蛋白抗体 Anti-NRIP |
树脂法唾液DNA萃取试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体 Anti-RPS6KA1/p90RSK/RSK1 |
原钙粘蛋白γA7抗体 |
锌指蛋白318抗体 Anti-ZNF318 |
PCDHGA7 |
溶质载体蛋白家族20成员2抗体 Anti-SLC20A2/PIT2 |
组织蛋白酶S抗体 |
大鼠Apelin(APLN)elisa分析检测试剂盒 |
Cathepsin S |
APLN ELISA Kit |
TGF-β诱导早期应答基因1抗体 Anti-TIEG1/KLF10 |
人肝X受体α(LXRα)elisa分析检测试剂盒 |
三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体IL1B_HUMAN; Interleukin-1 beta; interleukin 1 beta; IL1F2; IL-1 beta; Catabolin; IL-1; IL1F2; IL1beta; IL1-BETA; IL-1beta; IL-1 Beta; IL-1β; IL1β; IL-1B; IL1B; IL-1B; IL-1 ß; IL-1-ß; IL-1 ß; |