一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004441 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004441 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004441 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:ADAMTS5
中文名称:软骨蛋白聚糖抗体
别 名;A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin
motifs 5; A disintegrin like and metalloprotease (reprolysin type) with
thrombospondin type 1 motif 5; A Disintigrin And Metalloproteinase with
ThromboSpondin motif-5; ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif
5; ADAM TS 11; ADAM TS 5; ADAM TS5; ADAMTS 11; ADAMTS 5; ADAMTS11; ADMP 2;
ADMP2; Aggrecanase 2; aggrecanase-2; FLJ36738; Implantin; ThromboSpondin
motif-5.
研究领域; 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;102kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide
derived from human ADAMTS5: 511-610/930
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Cleaves aggrecan, a cartilage proteoglycan, and may be involved in its turnover. May play an important role in the destruction of aggrecan in arthritic diseases. May play a role in proteolytic processing mostly during the peri-implantation period.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
红细胞膜脂质成分分离试剂盒 |
Rho鸟甘酸转运蛋白抗体 Anti-PDZ RHOGEF/GTRAP48 |
钾离子通道蛋白7抗体 |
谷氨酸受体调节蛋白2抗体 Anti-NARG2 |
KCNK7 |
乙肝病毒表面抗原单克隆抗体 |
细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白3抗体 |
HBsAg |
大鼠中性粒细胞明胶酶关联脂质运载蛋白(NGAL)elisa检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂14抗体 Anti-SERPINI2/PI14 |
CDKN3 |
细胞毒性受体NK-p80抗体 |
纯化线粒体膜流动性(membrane fluidity)荧光检测试剂盒 |
NKp80 |
通用型猪胸膜肺炎(APP)基因检测试剂盒 |
核蛋白p8抗体 Anti-NUPR1/p8 |
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)试剂盒 |
β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体 Anti-RIAM/APBB1 interacting protein 1 |
肌球蛋白IIIB抗体 |
Sema6A抗体 Anti-Sema6A |
Myosin IIIB |
肿瘤抑制基因Testin抗体 Anti-Testin |
纤维母细胞生长因子6抗体 |
大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)elisa分析检测试剂盒 |
FGF6 |
CCK ELISA Kit |
Thimet内肽酶抗体 Anti-THOP1/Thimet Oligopeptidase |
山羊C型钠尿肽(CNP)elisa分析检测试剂盒 |
软骨蛋白聚糖抗体Bardet Biedl syndrome 6 protein; Bardet-Biedl syndrome 6 protein; BBS6; HMCS; KMS; McKusick Kaufman syndrome; McKusick Kaufman/Bardet Biedl syndromes putative chaperonin; McKusick-Kaufman/Bardet-Biedl syndromes putative chaperonin; Mkks; MKKS_HUMAN; MKS. |