一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012121 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012121 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012121 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Protor-1
中文名称:乳腺癌抑制基因Protor1抗体
别 名;Arhgap8; AU043908; C030017C09Rik; C78947;
FLJ20185; FLJ20185k; MGC109513; MGC32512; PP610; Proline rich 5 (renal);
Proline-rich protein 5; Protein observed with Rictor-1; Protor-1; PROTOR1;
PRR5; PRR5_HUMAN; PTOR1; RP1-181C9.3.
研究领域; 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 细胞凋亡 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Chicken, Dog, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;43kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Protor-1: 51-150/388
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Subunit of mTORC2, which regulates cell growth and survival in response to hormonal signals. mTORC2 is activated by growth factors, but, in contrast to mTORC1, seems to be nutrient-insensitive. mTORC2 seems to function upstream of Rho GTPases to regulate the actin cytoskeleton, probably by activating one or more Rho-type guanine nucleotide exchange factors. mTORC2 promotes the serum-induced formation of stress-fibers or F-actin. mTORC2 plays a critical role in AKT1 'Ser-473' phosphorylation, which may facilitate the phosphorylation of the activation loop of AKT1 on 'Thr-308' by PDK1 which is a prerequisite for full activation. mTORC2 regulates the phosphorylation of SGK1 at 'Ser-422'. mTORC2 also modulates the phosphorylation of PRKCA on 'Ser-657'. PRR5 plays an important role in regulation of PDGFRB expression and in modulation of platelet-derived growth factor signaling. May act as a tumor suppressor in breast cancer.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MouseGastrinELISAKit |
小鼠草胺膦乙酰转移酶(PAT)elisa检测试剂盒 |
大鼠凋亡相关因子配体(FASL)elisa分析检测试剂盒 |
鸽子胃动素(MTL)elisa分析检测试剂盒 |
FASL ELISA Kit |
MXI1蛋白抗体 |
山羊丙二醛(MDA)elisa分析检测试剂盒 |
MXI1 |
兔过氧化物酶体增殖物激活受体β(PPARβ)elisa检测试剂盒 |
比色法定量检测试剂盒 |
MDAELISAKit |
2号染色体开放阅读框68抗体 |
明胶琼脂平板 |
C2orf68 |
大鼠前列腺素D2(PGD2)elisa检测试剂盒 |
磷酸化减数分裂重组蛋白家族REC8抗体 Anti-phospho-REC8(Ser251) |
小鼠组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)elisa检测试剂盒 |
核因子κB抑制蛋白α抗体 Anti-NFKBIA/IKB alpha |
蝌蚪γ氨基丁酸(GABA)elisa分析检测试剂盒 |
味觉受体蛋白家族2亚基16抗体 Anti-TAS2R16 |
GABA ELISA Kit |
细胞S期激酶相关蛋白2抗体 Anti-SKP2/skp2 p45 |
人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)elisa分析检测试剂盒 |
PE标记的兔抗小鼠IgG H&L-Fc |
PDIA3ELISAKit |
Rabbit Anti-Mouse IgG Fc / PE |
蛋白表位标记技术试剂盒 |
磷酸核糖焦磷酸合成酶相关蛋白1抗体 |
乳腺癌抑制基因Protor1抗体HIV1 gp41; HIV-1 gp41; HIV1gp41; HIVgp41; Transmembrane protein gp41; Glycoprotein 41; Human Immunodeficiency Virus 1; HIV1 ENV (gp160); HIV1 gp160; HIV1gp160; HIV-1 gp160; env; Env polyprotein; Envelope glycoprotein gp160; Glycoprotein 41; gp41; HIV1; HIV1 clade a; HIV1/Clade A; SU; Surface protein; Human Immunodeficiency Virus Type 1 TM; Transmembrane protein; ENV_HV1MV. |