一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009585 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009585 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009585 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:HSP47
中文名称:热休克蛋白-47抗体
别 名;47 kDa heat shock protein; 47 kDa heat shock
protein precursor; Arsenic transactivated protein 3; AsTP 3; AsTP3; CBP 1; CBP
2; CBP1; CBP2; Collagen binding protein 1; Collagen binding protein 2; Collagen
binding protein; Colligen; Colligin 1; Colligin 2; Colligin; gp46; Heat shock
protein 47; HGNC 1547; Hsp 47; J6; PIG 14; PIG14; PPROM; Proliferation inducing
gene 14; Proliferation inducing gene 14 protein; RA A47; Rheumatoid arthritis
antigen A 47; Rheumatoid arthritis related antigen RA A47; Serine or cysteine
proteinase inhibitor clade H member 1; Serine or cysteine proteinase inhibitor
clade H member 2; Serpin H1; Serpin peptidase inhibitor clade H member 1;
SERPINH1; SERPINH2; SERPH_HUMAN.
研究领域; 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other
applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;44kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human HSP47: 331-416/416
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Binds specifically to collagen. Could be involved as a chaperone in the biosynthetic pathway of collagen.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
CORTELISAKit |
大鼠整合素α6(ITGα6)elisa检测试剂盒 |
大鼠γ干扰素受体(IFN-γR)elisa分析检测试剂盒 |
粪便伤(Salmonella Typhi)定性基因检测试剂盒 |
IFN-γR ELISA Kit |
NLRP13蛋白抗体 |
人红细胞原卟啉(EP)elisa分析检测试剂盒 |
NLRP13 |
大鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)elisa检测试剂盒免费代测 |
EPELISAKit |
8号染色体开放阅读框77抗体 |
小鼠卷曲螺旋域结合蛋白80(CCDC80)elisa检测试剂盒 |
C8orf77 |
体液过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性 |
亲环蛋白(亲环素)PPIG抗体 Anti-PPIG |
牛乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)elisa分析检测试剂盒 |
修补相关蛋白PTCHD3抗体 Anti-PTCHD3 |
鱼5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa分析检测试剂盒 |
干燥综合征相关蛋白2抗体 Anti-TROVE-2/SSA2 |
5HT/ST ELISA kit |
脱髓鞘相关蛋白SH3TC2N抗体 Anti-SH3TC2 |
人表达于SiSo细胞系的受体结合型肿瘤抗原(RCAS1)elisa分析检测试剂盒 |
辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体 |
HumanRCAS1ELISAkit |
Rabbit Anti-Dog IgM / HRP |
纯化溶酶体功能中性红检测试剂盒 |
小泛素相关修饰蛋白1抗体 |
热休克蛋白-47抗体MIG; CMK; C-X-C motif chemokine 9; CXCL9; chemokine (C-X-C motif) ligand 9; crg-10; Humig; monokine induced by gamma interferon; SCYB9; Small inducible cytokine B9; small inducible cytokine subfamily B member 9. |