一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004377 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004377 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004377 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Aldolase A
中文名称:醛缩酶A抗体
别 名;ALDA; Aldo1; ALDOA; ALDOA_HUMAN; Aldolase 1;
Aldolase A; Aldolase A fructose bisphosphatase; Aldolase A fructose
bisphosphate; FRUCTOALDOLASE A; Fructose 1 6 bisphosphate triosephosphate
lyase; Fructose bisphosphate aldolase A; Fructose bisphosphate aldolase;
FRUCTOSE-1,6-BISPHOSPHATE ALDOLASE A; Fructose-bisphosphate aldolase A;
Fructose-bisphosphate aldolase A Muscle-type; GSD12; Lung cancer antigen NY LU
1; Lung cancer antigen NY-LU-1; MGC10942; MGC17716; MGC17767; Muscle type
aldolase; Muscle-type aldolase; RNALDOG5.
转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg /test IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;39kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Aldolase A: 261-364/364
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is
intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic
applications.
Aldolase A (fructose
bisphosphate aldolase) is a glycolytic enzyme that catalyzes the reversible
conversion of fructose-1,6-bisphosphate to glyceraldehyde 3 phosphate and
dihydroxyacetone phosphate. Three aldolase isozymes (A, B, and C), encoded by
three different genes, are differentially expressed during development.
Aldolase A is found in the developing embryo and is produced in even greater
amounts in muscle. Aldolase A expression
is repressed in liver, kidney and intestine
and similar to aldolase C levels in brain and other nervous tissue. Aldolase A
deficiency has been associated with myopathy and hemolytic anemia. Alternative
splicing of this gene results in multiple transcript variants which encode the
same protein.
Cellular localization:Cytoplasmic
产品介绍:
Plays a key role in glycolysis and gluconeogenesis. In addition, may also function as scaffolding protein.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
U-TSHELISAKit |
小鼠促卵泡素(FSH)elisa检测试剂盒 |
仓鼠白介素1α(IL-1α)elisa分析检测试剂盒 |
二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)测试盒 |
IL-1α ELISA Kit |
RAS相关蛋白Rab5B抗体 |
人电压门控钾通道(VGKC)elisa分析检测试剂盒 |
RAB5B |
小鼠促甲状腺(TSH)elisa检测试剂盒 |
细胞化学AP酶联NBT/BCIP完全间接检测试剂盒(含一抗和AP二抗) |
VGKCELISAKit |
丝裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗体 |
石蜡切片神经纤维银染(Bodian)试剂盒 |
JIP2 |
分型巯基-SH测试盒 24T 100管/24样 微板法 |
26S蛋白酶调节亚型S5a抗体 Anti-Proteasome 19S S5A |
植物脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量检测试剂盒 |
桥粒斑菲素蛋白2抗体 Anti-Plakophilin 2 |
干扰素调节因子8抗体 |
去泛素化酶3抗体 Anti-USP3 |
IRF8 |
信号诱导增殖相关蛋白1抗体 Anti-SIPA1 |
碳酸酐酶12抗体 |
Cy5.5标记的羊抗兔IgG H&L |
CA12 |
Goat Anti-Rabbit IgG H&L / Cy5.5 |
明胶载玻片 |
FXL19蛋白抗体 |
醛缩酶A抗体Beta crystallin B1; Beta-B1 crystallin; Beta-crystallin B1; CRBB1_HUMAN; CRYBB 1; Crybb1; Crystallin beta B1; Eye lens structural protein; OTTHUMP00000028719. |