一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011245 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011245 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011245 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-MAP1LC3A (Ser12)
中文名称:磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体
别 名;MAP1LC3A(phospho Ser12); MAP1LC3A(phospho
S12); ATG8E; Autophagy-related protein LC3 A; Autophagy-related ubiquitin-like
modifier LC3 A; LC3; LC3A; MAP1 light chain 3 like protein 1; MAP1 light chain
3-like protein 1; MAP1A/1B light chain 3 A; MAP1A/MAP1B LC3 A; MAP1A/MAP1B
light chain 3 A; MAP1ALC3; MAP1BLC3; Map1lc3a; Microtubule associated proteins
1A/1B light chain 3; Microtubule-associated protein 1 light chain 3 alpha;
Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A; MLP3A_HUMAN.
产品类型;磷酸化抗体
信号转导 细胞骨架 线粒体 细胞自噬
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Cow, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;14kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜 线粒体
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human MAP1LC3A around the phosphorylation site of
Ser12: RR(p-S)FA
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Involved in formation of autophagosomal vacuoles (autophagosomes).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
FSELISAKit |
小鼠NAD依赖性蛋白脱乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)elisa检测试剂盒 |
S100A5 ELISA kit |
癌/睾丸抗原抗体86抗体 |
人胱天蛋白酶1(Casp-1)elisa分析检测试剂盒 |
OIP-5/CT86 |
大鼠糖类抗原199(CA199)elisa检测试剂盒 |
细胞CASPASE-10蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
Casp-1ELISAKit |
9号染色体开放阅读框89抗体 |
植物提取液 100ml / |
C9orf89 |
小量质粒抽提试剂盒 |
颗粒蛋白前体抗体 Anti-PGRN/Granulin |
人甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽1(C4/C2 RA反应因子的激活因子)(MASP1)elisa分析检测试剂盒 |
外周苯二氮受体抗体 Anti-PBR/DBI/TSPO |
小尾寒羊瘦素(LEP)elisa分析检测试剂盒 |
肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体 Anti-TNFAIP1 |
LEP ELISA kit |
信号转导衔接蛋白1抗体 Anti-STAM |
人白介素2受体(IL2R)elisa分析检测试剂盒 |
Cy7标记的小鼠抗牛IgG H&L |
IL2RELISAkit |
Mouse Anti-Bovine IgG H&L / Cy7 |
维生素B2比色法定量检测试剂盒 |
溶质载体家族25成员48抗体 |
磷酸化自噬微管相关蛋白轻链3抗体toll-like receptor 5; FLJ10052; MGC126430; MGC126431; TIL 3; TIL3; TLR 5; Toll like receptor 5; Toll like receptor 5 precursor; Toll/interleukin 1 receptor like protein 3;CD285; TLR5_MOUSE. |