一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ003673 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ003673 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ003673 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Phospho-Aurora B (Tyr12)
中文名称:磷酸化有丝分裂激酶B抗体
别 名;Aurora B (phospho Y12); AURKB_HUMAN; Aurora B
(phospho T12); AIK2; AIM1; ARK2; AurB; AURKB; Aurora 1; Aurora and Ipl1 like
midbody associated protein 1; Aurora kinase B; Aurora related kinase 2;
Aurora-B; Aurora/IPL1 related kinase 2; IPL1; Serine/theronine kinase 12;
Serine/threonine protein kinase 12; STK1; STK12; STK5.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Mouse, (predicted: Human, Rat, Pig, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;39kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human Aurora B around the phosphorylation site of
Tyr12: WP(p-Y)GR
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
May be directly involved in regulating the cleavage of polar spindle microtubules and is a key regulator for the onset of cytokinesis during mitosis. Component of the chromosomal passenger complex (CPC), a complex that acts as a key regulator of mitosis. The CPC complex has essential functions at the centromere in ensuring correct chromosome alignment and segregation and is required for chromatin-induced microtubule stabilization and spindle assembly. Phosphorylates 'Ser-10' and 'Ser-28' of histone H3 during mitosis. Required for kinetochore localization of BUB1 and SGOL1. Interacts with INCENP.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
BAXELISAKit |
尼氏染色试剂盒(甲基紫法)2×50ml |
大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠髓过氧化物酶(MPO)elisa检测试剂盒免费代测 |
DAO ELISA Kit |
粘蛋白20抗体 |
山羊胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)elisa分析检测试剂盒 |
MUC20 |
BAD蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
组织因子(TISSUE FACTOR)活性荧光定量检测试剂盒 |
CCK-8ELISAKit |
C2orf15抗体 |
大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)elisa检测试剂盒 |
C2orf15 |
小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基转移酶3A(DNMT3A)elisa检测试剂盒 |
环指蛋白44抗体 Anti-RNF44 |
糖浆麦芽糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 |
DNA损伤关卡蛋白1抗体 Anti-NFBD1/MDC1 |
鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa分析检测试剂盒 |
组织因子抗体 Anti-Tissue factor/CD142/F3 |
eNOS ELISA Kit |
CD2F-10抗体 Anti-SLAMF9 |
人蛋白酶体(prosome,macropain)亚基,β型,1(PSMB1)elisa分析检测试剂盒 |
PE-Cy3标记的兔抗猴IgM |
HumanPSMB1ELISAkit |
Rabbit Anti-Monkey IgM / PE-Cy3 |
通用型禽脑脊髓炎(Avian Encephalomyelitis;AE) |
血小板白细胞C激酶底物源结构域M3抗体 |
磷酸化有丝分裂激酶B抗体Adenosylhomocysteinase; AdoHcyase; ahcY; S adenosyl L homocysteine hydrolase; S adenosylhomocysteine hydrolase; S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase; SAHH; SAHH_HUMAN. |