一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007825 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007825 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007825 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-FLNC (Ser2233)
中文名称:磷酸化细丝蛋白2抗体
别 名;FLNC (phospho S2233); p-Filamin 2 (phospho
S2233); p-FLNC (phospho S2233); ABP 280; ABP L; ABPL; Actin binding like
protein; Actin binding protein 280; Filamin 2; Filamin2; Filamin-2; Filamin C;
Filamin C gamma; FLJ10186; FLN 2; FLN2; FLNC; Gamma actin binding protein; Gamma
filamin; Protein FLNc; FLNC_HUMAN; Filamin-C; FLN-C; ABP-280-like protein;
ABP-L; Actin-binding-like protein.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞骨架 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;300kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthesised
phosphopeptide derived from human FLNC around the phosphorylation site of
Ser2233: LG(p-S)FG
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
FLNC is a muscle-specific filamin, which plays a central role in muscle cells, probably by functioning as a large actin-cross-linking protein. May be involved in reorganizing the actin cytoskeleton in response to signaling events, and may also display structural functions at the Z-disks in muscle cells. Defects in FLNC are the cause of autosomal dominant filaminopathy.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
BMP-7ELISAKit |
兔血管内皮细胞生长因子elisa检测试剂盒 |
仓鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠前列腺素E2合成酶(PGES)elisa检测试剂盒 |
sVCAM-1 ELISA Kit |
肝磷酸酯酶2抗体 |
人动力蛋白轻链1,细胞质(DYNLL1/DLC1/DNCL1/DNCLC1/HDLC1)elisa分析检测试剂盒 |
PTP4A2 |
人肝细胞生长因子受体(c-MET/HGFR)elisa检测试剂盒 |
冰冻切片细胞有丝分裂NBT显色检测试剂盒 |
HumanDYNLL1ELISAkit |
小肠型脂肪酸结合蛋白抗体 |
组织肌酸激酶工酶混合型(CK-MB)活性比色法定量检测试剂盒 |
intestinal FABP |
大鼠固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP-1C)elisa检测试剂盒 |
原钙粘蛋白β3抗体 Anti-PCDHB3 |
小鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)elisa分析检测试剂盒 |
端粒酶抑制因子PinX-1抗体 Anti-PINX-1 |
8号染色体开放阅读框35抗体 |
泛素蛋白连接酶E3抗体 Anti-UBE2E3 |
INTS10/C8orf35 |
粘结蛋白SA2抗体 Anti-SA2 |
6号染色体开放阅读框223抗体 |
碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗人IgG H&L |
C6orf223 |
Goat Anti-Human IgG H&L / AP |
(链)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 |
Cervical cancer oncogene 3/宫颈癌原癌基因3抗体 |
磷酸化细丝蛋白2抗体Smad ubiquitination regulatory factor 1; Smad ubiquitination regulatory factor 1; Smad specific E3 ubiquitin ligase 1; E3 ubiquitin-protein ligase SMURF1; hSMURF1; Smad specific E3 ubiquitin ligase 1; SMAD specific E3 ubiquitin protein ligase 1; Smad ubiquitination regulatory factor 1; SMAD-specific E3 ubiquitin-protein ligase 1; SMUF1_HUMAN; SMURF 1; smurf1. |