一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006137 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006137 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006137 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-CstF64 (Ser83)
中文名称:磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体
别 名;p-CstF-64 (Ser83); p-CstF-64 (S83); CstF64
(phospho-Ser83); CstF64 (phospho-S83); CSTF2T; CF1 64 kDa subunit, tau variant;
Cleavage stimulation factor 64 kDa subunit, tau variant; CSTF 64 kDa subunit,
tau variant; KIAA0689; TauCstF64; CSTF2_HUMAN.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 细胞生物 细胞分化 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow,
Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;61kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthesised
phosphopeptide derived from human CstF64 around the phosphorylation site of
Ser83: EF(p-S)GR
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
One of the multiple factors required for polyadenylation and 3'-end cleavage of mammalian pre-mRNAs. This subunit is directly involved in the binding to pre-mRNAs (By similarity).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
BMPR-ⅡELISAKit |
水样中六价铬离子(Cr6+)浓度测试盒 |
仓鼠铁蛋白(FE)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)elisa检测试剂盒 |
FE ELISA kit |
蛋白酶体抑制剂亚基PI31抗体 |
人端粒酶(TE)elisa分析检测试剂盒 |
PSMF1 |
大鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa分析检测试剂盒 |
石蜡切片组织线粒体DNA萃取试剂盒 |
TEELISAKit |
钙反应因子抗体 |
小鼠趋化因子配体1(CCL1)elisa分析检测试剂盒 |
CDKN2AIP |
细胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
原钙粘蛋白γB4抗体 Anti-PCDHGB4 |
人EB病毒核抗原3A抗体(IgM)elisa检测试剂盒 |
蛋白质磷酸酶2调节亚基5C/PP2A-B56-γ抗体 Anti-PPP2R5C |
干扰素α11抗体 |
泛素蛋白连接酶G2抗体 Anti-Ube2G2/UBC7 |
Interferon alpha 11 |
染色体结构维持蛋白2抗体 Anti-SMC2 |
前梯度源蛋白2抗体 |
碱性磷酸酶(AP)标记的驴抗羊IgG H&L |
Anterior Gradient 2 |
Donkey Anti-Goat IgG H&L / AP |
细胞中链脂酰氧化酶(acyl-CoA oxidase) |
锌指蛋白297B抗体 |
磷酸化细胞分裂相关蛋白CSTF64抗体semaphorin 6A; Sema Q; Sema VIA; SEMA6A-1; Semaphorin 6A-1; Semaphorin Q; Semaphorin VIA; HT018; SEM6A_HUMAN; SEMA; Sema domain, transmembrane domain (TM), and cytoplasmic domain, (semaphorin) 6A; SEMA6A 1; Sema6a; SEMA6A1; Semaphorin 6A 1; Semaphorin Q; Semaphorin VIA; Semaphorin-6A; Semaphorin-6A-1; SEMAQ; VIA. |