一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004209 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004209 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004209 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-AQP2 (Ser256)
中文名称:磷酸化水通道蛋白2抗体
别 名;Aquaporin 2 (phospho S256); Aquaporin 2
(phospho Ser256); p-Aquaporin 2 (phospho S256); p-Aquaporin 2 (S256); ADH water
channel; AQP 2; AQP CD; AQP2; AQPCD; Aquaporin 2 collecting duct; Aquaporin CD;
Aquaporin2; Aquaporine 2; Collecting duct water channel protein; MGC34501;
Water channel protein for renal collecting duct; WCH CD; WCHCD; AQP2_HUMAN.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 细胞生物 信号转导 通道蛋白 细胞粘附分子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Dog, (predicted: Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow,
Horse, Rabbit, Monkey, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;29kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthesised
phosphopeptide derived from human AQP2 around the phosphorylation site of
Ser256: RQ(p-S)VE
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Forms a water-specific channel that provides the plasma membranes of renal collecting duct with high permeability to water, thereby permitting water to move in the direction of an osmotic gradient.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
NAGELISAKit |
人球蛋白G(IgG)elisa检测试剂盒 |
大鼠芳烃受体核转位因子样蛋白1(ARNTL)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠甲羟戊酸5-焦磷酸脱羧酶(MDD)elisa分析检测试剂盒 |
ARNTL ELISA kit |
肌管素相关蛋白8抗体 |
山羊过氧化氢酶(CAT)elisa分析检测试剂盒 |
MTMR8 |
位素法DNA斑点杂交试剂盒 |
猪核因子-κB(NF-κB)elisa检测试剂盒 |
CATELISAkit |
22号染色体开放阅读框32抗体 |
貂环磷酸腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒免费代测 |
C22orf32 |
小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)elisa检测试剂盒 |
磷酸化Rho相关蛋白激酶2抗体 Anti-phospho-ROCK2(Tyr256) |
通用型赖(lysine)含量荧光定量检测试剂盒 |
轴索过度生长抑制因子A+B抗体 Nogo-B/A Anti-Nogo A+B |
裸鼠环加氧酶2(COX-2)elisa分析检测试剂盒 |
谷氨酰胺转胺酶1抗体 Anti-Transglutaminase |
COX-2 ELISA kit |
突触泡蛋白2A抗体 Anti-SV2A |
人低密度脂蛋白(LDL)elisa分析检测试剂盒 |
辣根过氧化物酶标记的兔抗大鼠IgG H&L |
LDLELISAKit |
Rabbit Anti-Rat IgG H&L / HRP |
组织HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒 |
细胞增殖诱导蛋白54抗体 |
磷酸化水通道蛋白2抗体Alternative names42C; Annexin II ligand; Annexin II ligand, calpactin I, light polypeptide; Annexin II, light chain; ANX2L; ANX2LG; CAL12; CAL1L; Calpactin I light chain; Calpactin I, p11 subunit; Calpactin-1 light chain; Cellular ligand of annexin II; CLP11; GP11; Nerve growth factor-induced protein 42C; p10 antibody p10 protein; p11; Protein S100 A10; Protein S100-A10; S100 calcium binding protein A10 (annexin II ligand, calpactin I, light polypeptide (p11)); S100 calcium binding protein A10 (calpactin); S100 calcium binding protein A10; S100 calcium-binding protein A10; S100a10; S10AA_HUMAN. |